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摘要：目的提取純化百日咳鮑特菌（簡(jiǎn)稱百日咳桿菌）脂寡糖（lipo-oligosaccharides,LOS）,制備百日咳桿菌多糖蛋白結(jié)合物,并分析其理化性質(zhì)及免疫原性。方法通過(guò)改良熱酚水法提取百日咳桿菌的LOS,采用酶解法純化LOS,通過(guò)1%冰醋酸水解獲得寡糖（oligosaccharides,OS）,產(chǎn)物經(jīng)Tricine-SDS-PAGE及核磁共振氫譜（^1H NMR）鑒定。OS的羥基經(jīng)1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯（1-cyano-4-dimethylamino pyridinium tetrafluoroborate,CDAP）活化后,與破傷風(fēng)類毒素己二酸酰肼衍生物（TTAH））共價(jià)結(jié)合,制備多糖蛋白結(jié)合物,經(jīng)Sephacryl S-300層析柱純化后收集結(jié)合物原液,并對(duì)結(jié)合物的理化性質(zhì)、抗原性進(jìn)行分析,采用兩種劑量（2.5μg/劑和5.0μg/劑）免疫BALB/c小鼠,分析其免疫原性。結(jié)果純化后LOS純度〉90%,核磁共振結(jié)果表明OS結(jié)構(gòu)正確,功能基團(tuán)得到保留。制備的結(jié)合物抗原性未發(fā)生改變,經(jīng)3針免疫后,兩種劑量下結(jié)合物均有劑次加強(qiáng)效應(yīng)（P〈0.05）,且兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〉0.05）。結(jié)論將百日咳桿菌OS與TTAH結(jié)合是制備百日咳桿菌多糖蛋白結(jié)合疫苗的可行途徑,并且結(jié)合物在小鼠體內(nèi)具有良好的免疫應(yīng)答。

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