白藜蘆醇對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨/成脂分化的影響
摘要:目的探討白藜蘆醇(resveratrol,RES)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)成骨/成脂分化的影響。方法分離培養(yǎng)C57BL/6小鼠BMSCs,分離純化至3代后進(jìn)行藥物干預(yù),并分別誘導(dǎo)其向成骨/成脂分化。對(duì)照組為未經(jīng)藥物處理誘導(dǎo)組,實(shí)驗(yàn)組為應(yīng)用不同濃度RES干預(yù)后再進(jìn)行成骨/成脂誘導(dǎo)組。成骨誘導(dǎo)14天后應(yīng)用堿性磷酸酶染色和茜素紅染色檢測(cè)各組細(xì)胞中礦化區(qū)染色面積和礦化結(jié)節(jié)數(shù)量。成脂誘導(dǎo)14天后進(jìn)行油紅O染色檢測(cè)各組脂肪滴數(shù)量,并應(yīng)用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT—PCR)檢測(cè)各組細(xì)胞中成骨/成脂分化相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果堿性磷酸酶染色和茜素紅染色結(jié)果顯示,20μmol/LRES預(yù)處理BMSCs并經(jīng)成骨誘導(dǎo)后,細(xì)胞中礦化區(qū)染色面積和礦化結(jié)節(jié)數(shù)量均明顯高于1μmol/L、5μmol/L和10Ixmol/LRES組;同時(shí)qRT—PCR結(jié)果顯示,20μmol/LRES預(yù)處理BMSCs并經(jīng)成骨誘導(dǎo)后,其成骨分化相關(guān)基因mRNA表達(dá)呈劑量依賴性增加。油紅O染色結(jié)果表明,20μmol/LRES預(yù)處理BMSCs并經(jīng)成脂誘導(dǎo)后,細(xì)胞中脂肪油滴數(shù)量顯著低于1μmol/L、5μmol/L和10μmol/LRES組;同時(shí)qRT—PCR結(jié)果顯示,20μmol/LRES預(yù)處理BMSCs并經(jīng)成脂誘導(dǎo)后,細(xì)胞中成脂分化相關(guān)基因mRNA的表達(dá)呈劑量依賴性降低。結(jié)論RES預(yù)處理能夠促進(jìn)BMSCs向成骨分化,抑制其向成脂分化,這一發(fā)現(xiàn)可能為骨質(zhì)疏松的藥物治療提供新思路。
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