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拮抗甲狀腺刺激性抗體單鏈抗體的制備及鑒定

王素莉 趙禹 陳祖培 田恩江 陳昆明 郭琳 潘紅艷 李強(qiáng) 高海林 張曉光 武警醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科 天津300162 內(nèi)蒙古林業(yè)總醫(yī)院內(nèi)分泌科 內(nèi)蒙古牙克石022150 天津醫(yī)科大學(xué)內(nèi)分泌研究所 300070 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科 317000

摘要:目的構(gòu)建一個(gè)針對(duì)Graves病(GD)患者IgG的鼠單鏈抗體,體外實(shí)驗(yàn)證明其是否具有拮抗甲狀腺刺激性抗體(TSAb)的能力。方法利用噬菌體展示技術(shù),得到一個(gè)抗TSAb的噬菌體抗體scFv,測(cè)定其相對(duì)親和力。用表達(dá)重組人促甲狀腺激素受體(hTSHR)的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞測(cè)定GD患者血中TSAb水平,并觀察此scFv片段對(duì)GD患者IgGs誘導(dǎo)cAMP釋放的抑制作用。結(jié)果16例GD患者中有13例TSAb活性被scFv克隆T17顯著抑制(最大抑制率為88%),相對(duì)親和力為2.8mol/L。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)利用噬菌體展示技術(shù),篩選出一個(gè)具有較強(qiáng)拈抗TSAb活性的scFv克隆(T17)。

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