大鼠脊髓損傷早期CNTF與NT-4表達變化及其相互關系
摘要：目的 探討內源性睫狀細胞神經生長因子（ciliary neurotrophic factor, CNTF）和神經營養因子4（neurotrophin-4, NT-4）在大鼠脊髓損傷（spinal cord injury, SCI）早期的表達變化及其相互關系，為SCI神經營養因子療法提供理論依據。 方法 成年Sprague Dawley（SD）大鼠45只隨機分為假手術（Sham）組、SCI-12h、SCI-1d、SCI-3d和SCI-7d組（ n =9）。各SCI組大鼠均采用改良Allen＇s法制備T10節段脊髓頓挫傷模型，用BBB（Basso-Beattie-Bresnahan locomotor, BBB）評分法評估各組大鼠后肢運動功能；采用熒光定量PCR（Q-PCR）及免疫組織化學染色檢測大鼠脊髓頓挫傷后CNTF與NT-4的表達情況;利用GeneMANIA數據庫對CNTF與NT-4的相互作用進行預測分析。 結果 術后Sham組大鼠BBB評分不變，SCI組大鼠損傷平面以下完全癱瘓，BBB評分為0，SCI-7d組評分較SCI-12h組高（ P ＜0.01），但仍低于Sham組（ P ＜0.01）。與Sham組相比，SCI-12h組CNTF mRNA相對表達量降低（ P ＜0.05），于SCI-3d組降至最低（ P ＜0.05）；NT-4 mRNA相對表達量在SCI-12h組無變化，于SCI-1d組表達增高（ P ＜0.05），至SCI-7d組表達降低（ P ＜0.01），但與Sham組比較差異無統計學意義（ P ＞0.05）。免疫組織化學染色結果顯示，CNTF在神經元與神經膠質細胞均有表達，NT-4主要在神經元表達。與Sham組相比，CNTF 與NT-4陽性神經元數量及IOD值均在SCI-12h組減少（ P ＜0.01）；兩種蛋白質隨后呈現不同的變化趨勢：脊髓前角CNTF陽性神經元數量與IOD值分別在SCI-3d組與SCI-7d組再次降低（ P ＜0.01）；而NT-4陽性神經元與IOD值分別在SCI-7d組與SCI-3d組增高，表達水平接近Sham組。脊髓后角CNTF陽性神經元數量在SCI-1d組再次降低（ P ＜0.01），至SCI-7d組無變化；NT-4陽性神經元數量及其IOD值分別在SCI-1d組及SCI-7d組增高（ P ＜0.01），且SCI-7d組與Sham組比較差異無統計學意義（ P ＞0.05）。
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