人源S100A8重組質粒的構建及其對他莫昔芬治療乳腺癌的影響
摘要：目的 構建人源S1000A8的重組質粒，并在人乳腺癌細胞MCF7中表達，初步探索其對他莫昔芬處理下MCF7細胞的影響。 方法 設計合成針對人源S100A8基因cds區的引物序列，采用PCR的方法以人乳腺癌細胞MCF7的cDNA為模板，擴增目的基因S100A8，經過NdeⅠ和BamHⅠ雙酶切后，克隆至pCMV5-myc質粒上。通過脂質體轉染至MCF7細胞中，應用Western Blot法檢測其蛋白表達。脂質體轉染S100A8至MCF7細胞并應用他莫昔芬處理后，用MTT法檢測其細胞活力，Western Blot法檢測相關蛋白表達。 結果 酶切鑒定證明S100A8基因重組質粒構建成功，并且可以在MCF7細胞中過表達。MTT法顯示S100A8可以部分逆轉他莫昔芬所造成的細胞活力下降，部分抗凋亡分子表達上升。 結論 人源S100A8基因的重組質粒構建成功，為進一步研究S100A8在乳腺癌對他莫昔芬發生耐藥的過程中的作用奠定了基礎。
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