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加急見(jiàn)刊

人源S100A8重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)他莫昔芬治療乳腺癌的影響

汪彥陽(yáng); 陶志嵩; 徐佩 南京鼓樓醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科; 南京210000

摘要:目的 構(gòu)建人源S1000A8的重組質(zhì)粒,并在人乳腺癌細(xì)胞MCF7中表達(dá),初步探索其對(duì)他莫昔芬處理下MCF7細(xì)胞的影響。 方法 設(shè)計(jì)合成針對(duì)人源S100A8基因cds區(qū)的引物序列,采用PCR的方法以人乳腺癌細(xì)胞MCF7的cDNA為模板,擴(kuò)增目的基因S100A8,經(jīng)過(guò)NdeⅠ和BamHⅠ雙酶切后,克隆至pCMV5-myc質(zhì)粒上。通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染至MCF7細(xì)胞中,應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)其蛋白表達(dá)。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染S100A8至MCF7細(xì)胞并應(yīng)用他莫昔芬處理后,用MTT法檢測(cè)其細(xì)胞活力,Western Blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)。 結(jié)果 酶切鑒定證明S100A8基因重組質(zhì)粒構(gòu)建成功,并且可以在MCF7細(xì)胞中過(guò)表達(dá)。MTT法顯示S100A8可以部分逆轉(zhuǎn)他莫昔芬所造成的細(xì)胞活力下降,部分抗凋亡分子表達(dá)上升。 結(jié)論 人源S100A8基因的重組質(zhì)粒構(gòu)建成功,為進(jìn)一步研究S100A8在乳腺癌對(duì)他莫昔芬發(fā)生耐藥的過(guò)程中的作用奠定了基礎(chǔ)。

注: 保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán),如需閱讀全文請(qǐng)聯(lián)系成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)雜志社

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