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摘要：目的 構(gòu)建人源S1000A8的重組質(zhì)粒，并在人乳腺癌細(xì)胞MCF7中表達(dá)，初步探索其對(duì)他莫昔芬處理下MCF7細(xì)胞的影響。 方法 設(shè)計(jì)合成針對(duì)人源S100A8基因cds區(qū)的引物序列，采用PCR的方法以人乳腺癌細(xì)胞MCF7的cDNA為模板，擴(kuò)增目的基因S100A8，經(jīng)過NdeⅠ和BamHⅠ雙酶切后，克隆至pCMV5-myc質(zhì)粒上。通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染至MCF7細(xì)胞中，應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)其蛋白表達(dá)。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染S100A8至MCF7細(xì)胞并應(yīng)用他莫昔芬處理后，用MTT法檢測(cè)其細(xì)胞活力，Western Blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)。 結(jié)果 酶切鑒定證明S100A8基因重組質(zhì)粒構(gòu)建成功，并且可以在MCF7細(xì)胞中過表達(dá)。MTT法顯示S100A8可以部分逆轉(zhuǎn)他莫昔芬所造成的細(xì)胞活力下降，部分抗凋亡分子表達(dá)上升。 結(jié)論 人源S100A8基因的重組質(zhì)粒構(gòu)建成功，為進(jìn)一步研究S100A8在乳腺癌對(duì)他莫昔芬發(fā)生耐藥的過程中的作用奠定了基礎(chǔ)。

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