小鼠藍斑內去甲腎上腺能神經元與中腦導水管周圍灰質腹外側區谷氨酸能神經元的聯系
摘要:目的:在v Glu T2-ires-cre小鼠腦中利用重組狂犬病毒介導的逆行跨單級突觸追蹤和免疫熒光組織化學染色技術,研究藍斑(LC)和中腦導水管周圍灰質腹外側區(vl PAG)之間的纖維聯系。方法:首先將輔助病毒注入v Glu T2-ires-cre小鼠右側vl PAG內,三周過后將重組狂犬病毒注入相同區域。一周后,在激光共聚焦顯微鏡下觀察全腦突觸前神經元的分布;同時利用免疫熒光組織化學技術,特異性標記LC內去甲腎上腺素能神經元,觀察LC內去甲腎上腺素能神經元與狂犬病毒逆行標記的神經元之間的共存情況。結果:將狂犬病毒介導的逆行跨單級突觸病毒注入vl PAG后,腦內大量的核團,如背內側前額葉皮質(dm PFC)、前扣帶回皮質(ACC)、LC等,均可觀察到大量密集分布的突觸前神經元。利用免疫熒光組織化學雙重染色技術,觀察到LC內存在密集分布的TH樣免疫陽性神經元,且部分TH陽性神經元同時與狂犬病毒標記的神經元共標,證實LC和vl PAG之間存在纖維聯系。結論:LC內去甲腎上腺素能神經元發出投射至vl PAG,作用于其中的谷氨酸能神經元,該通路可能參與了鎮痛效應以及慢性痛狀態下覺醒的維持。
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