實驗室快速檢測細胞株支原體污染的方法研究
摘要：目的建立快速可靠的實驗室檢測細胞株培養中支原體污染的方法。方法采用DNA熒光染色試劑對本實驗室11株細胞進行熒光染色觀察與分析；同時從常見污染細胞的支原體16SrRNA中選擇兩段高度保守的核酸序列，作為支原體引物，采用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）法對同一批細胞株進行檢測，并對兩種檢測結果進行比較。結果采用DNA熒光染色法檢出11株細胞中有2株細胞出現陽性，陽性率為18．2％；采用PCR方法檢測11株細胞，有4株細胞出現陽性，陽性率為36．4％。通過兩種方法比較可以發現：DNA熒光染色法檢測結果陽性的細胞株用PCR方法檢測結果也是陽性。結論上述兩種方法均能有效地檢出細胞株中的支原體污染，DNA熒光染色法雖較PCR法靈敏度低，但操作簡便易觀察；而PCR法成本較高，將兩種方法結合應用，對DNA熒光染色法可疑陽性的標本再進行PCR檢測，既提高陽性檢出率，又節約了成本。
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