EB病毒基因Z2A原核表達載體的構建及表達
摘要：目的構建能分泌性表達EB病毒（Epstein—Barrvirus，EBV）融合基因Z2A的BCG重組質粒并導入BCG。方法分別以BCG和EBV融合基因eDNA為模板，通過PCR擴增得到139bp的BCG—Ag85B信號肽序列和2291bp的Z2A基因序列。將BCG-Ag85B信號肽序列與大腸桿菌一BCG穿梭表達載體pMV261重組，得到重組質粒pMVSo再將EBV融合基因序列Z2A亞克隆至pMVS中，得到重組質粒pMVZ2A，電轉化導入BCG，采用十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳對表達產物進行分析。結果構建的重組質粒pMVZ2A經雙酶切、PCR擴增及序列測定證實，克隆基因BCG-Ag85B信號肽和Z2A正確插入載體pMV261。重組質粒pMVZ2A電轉化導入BCG后能在BCG中有效表達相應蛋白。結論構建的重組質粒pMVZ2A能在BCG中表達相應蛋白。這一結果為改造BCG及發展新型抗EBV和結核桿菌的雙價疫苗奠定了基礎。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系國際生物制品學雜志社
相關推薦
更多
