α-烯醇化酶的翻譯后修飾對類風濕關節炎免疫診斷價值
摘要：探討α-烯醇化酶（α-enolase,ENO1）在類風濕關節炎（rheumatoid arthritis, RA）中的診斷意義。經過原核表達、Ni柱純化等操作,成功得到ENO1蛋白。將純化的蛋白分別進行瓜氨酸化及氨甲酰化修飾,得到瓜氨酸化α-烯醇化酶（citrullinatedα-enolase peptide,cit-ENO1）、氨甲酰化α-烯醇化酶（carbamylatedα-enolase peptide, carp-ENO1）以及瓜氨酸化氨甲酰化α-烯醇化酶（citrullinated-carbamylatedα-enolase peptide, cit-carp-ENO1）。選取RA患者30例（RA組）以及同期體檢正常者35例（對照組）,采用ELISA探究未修飾的蛋白以及這3種修飾后的蛋白對RA患者的診斷價值。通過SPSS軟件構建ROC曲線對不同修飾蛋白的診斷效能進行評估,當cut-off值取95%的特異度時,carp-ENO1的靈敏度為26.7%,cit-ENO1的靈敏度為46.7%,cit-carp-ENO1的靈敏度為63.3%。ENO1蛋白修飾之后對RA檢出率顯著提高,提示瓜氨酸化或者氨甲酰化之后的蛋白作為抗原對RA具有一定的診斷參考價值。
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