創傷弧菌溶細胞素特定氨基酸序列分析及其人源化單鏈抗體篩選
摘要：本研究利用生物信息學方法分析創傷弧菌（vibrio vulnificus, V.vulnificus）溶細胞素的蓖麻毒素結構域內氨基酸序列并合成多肽,篩選人工合成的單鏈抗體噬菌體文庫Tomlinson I＋J,為創傷弧菌感染的抗體阻斷治療研究奠定基礎。通過對未經處理的大容量Tomlinson I＋J噬菌體文庫進行3輪特異性親和篩選,從中篩到特異性結合溶細胞素多肽的克隆,命名為scFv-D2,經氨基酸序列分析驗證其含有完整的人源化抗體重鏈和輕鏈可變區。將scFv-D2克隆轉化E.coli HB2151并誘導表達,用ELISA方法檢測其可溶性scFv片段與溶細胞素毒性多肽的結合活性。結果顯示從Tomlinson I＋J文庫成功篩選出一株具有結合活性的人源化噬菌體單鏈抗體,可用于創傷弧菌感染抗體阻斷治療策略的研究。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系現代免疫學雜志社
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