基于微流控高分辨率熔解曲線的基因分型研究
摘要：目的建立一種用于人類乙醇脫氫酶2(acetaldehyde dehydrogenase 2, ALDH2)基因單核苷酸多態性位點準確快速分型的方法。方法將微流控芯片、實時熒光聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)與高分辨率熔解曲線技術相結合。采用聚合物材料制作微流控芯片,在確保熔解過程中溫度變化的均一性和精確性的同時,可顯著改善熱能傳輸,提高熱循環速度,縮短分析時間,從而實現對單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism,SNP)位點的快速檢測與分析。結果在自主研制的微流控高分辨率熔解曲線分析系統上,以標準質粒為實驗材料,測試了該系統的最低檢測限可達10 copies/μL。同時,成功地實現了人類ALDH2基因三種基因分型(AA/GG/AG)的檢測。結論微流控高分辨率熔解曲線分析系統為ALDH2基因分型提供了一種準確快速的檢測方法,對指導臨床硝酸甘油的個性化用藥具有重要意義。
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