燙傷血清對大鼠結腸平滑肌細胞骨架的影響
摘要:目的 了解燙傷血清對體外培養的大鼠結腸平滑肌細胞骨架的影響,初步探討傷后胃腸動力障礙的可能機制. 方法 分離培養健康成年Wistar大鼠結腸平滑肌細胞.另取2只健康成年Wistar大鼠,其中1只不致傷,另一只致深Ⅱ度燙傷,采集2只大鼠血液分離血清,用培養液配成體積分數20%的燙傷血清和體積分數20%的正常血清.采用隨機數字表法將大鼠平滑肌細胞分為燙傷血清組和正常血清組,分別用2種血清培養.于處理1、3、6、12 h時(每組每時相點樣本數均為10),用流式細胞儀檢測細胞肌動蛋白表達水平,并采用蛋白質印跡法檢測β微管蛋白的相對含量.對數據行t檢驗. 結果 (1)燙傷血清組細胞處理1、3、6、12 h時,肌動蛋白熒光強度分別為59±4、26±6、39±6、42±6,正常血清組分別為95±10、91±10、102±9、97±9,組間比較,差異均有統計學意義(t值分別為10.528、18.069、18.748、16.647,P<0.05或P<0.01);燙傷血清組組內比較,處理3 h時降至最低點,6、12 h持續回升.(2)燙傷血清組處理1、3、6、12 h時,β微管蛋白的相對含量分別為14.44±0.26、8.61±0.19、11.76±0.31、12.13±0.29;正常血清組分別為22.37±1.15、21.87±1.79、23.24±1.55、21.99±2.02,組間比較差異有統計學意義(t值分別為21.176、23.365、23.000、15.273,P值均小于0.01);燙傷血清組組內比較,處理3 h時達最低,6、12 h有所回升但勢頭緩慢.結論 燙傷血清作用初始階段,可使體外培養的大鼠腸道平滑肌細胞骨架含量減少,隨后細胞骨架含量呈回升趨勢,這可能與平滑肌細胞對燙傷血清刺激的耐受、適應和自我修復有關.
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