Methanopyrus sp. SNP6源黃素腺嘌呤二核苷酸合成酶序列分析及在大腸桿菌中的異源表達
摘要：Methanopyrus sp.SNP6是一株極端嗜熱產甲烷菌,本文將其黃素腺嘌呤二核苷酸合成酶基因（fads）進行生物信息學分析并在大腸桿菌中加以表達。生物信息學分析發現,FAD合成酶由150個氨基酸殘基組成,理論分子量為17 049.93,等電點為8.95;三級結構為同源二聚體,每個單體含有五股平行的（折疊,比典型的核苷酸結合折疊少一個β折疊。擴增fads基因,構建重組表達質粒p ET28b（＋）-fads,在大腸桿菌BL21（DE3）中誘導表達。實驗結果顯示,該FAD合成酶能在大腸桿菌中高效表達,但部分蛋白以包涵體形式存在。本研究對Methanopyrus sp.SNP6源FAD合成酶進行了蛋白質序列和結構的分析,并首次實現了其在大腸桿菌中的穩定高效表達,為后續該酶的研究和開發提供了基礎。
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