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摘要：目的 激活南海紅樹林來源的鏈霉菌Streptomyces youssoufiensis OUC6819中不表達(dá)或表達(dá)水平低的隱性基因簇,進(jìn)一步挖掘新穎的次級(jí)代謝產(chǎn)物。方法 采用PCR-targeting策略敲除WhiB-like(Wbl)家族的wblAyo基因,通過HPLC分析野生株和突變株發(fā)酵產(chǎn)物的差異,檢測(cè)發(fā)酵液粗提物和C18開放柱層析組分對(duì)5種多重耐藥(MDR)菌(Staphylococcus aureus CCARM 3090, Salmonella typhimurium CCARM 8250, Escherichia coli CCARM 1009, Enterococcus faecium CCARM 5203,Enterococcus faecalis CCARM 5172)的抑制活性,通過固體平板實(shí)驗(yàn)和光學(xué)顯微鏡觀察鏈霉菌形態(tài)分化的改變。結(jié)果 得到了正確的ΔwblAyo阻斷突變株,HPLC分析結(jié)果表明:與野生株相比,突變株中化合物峰1和2分別提高了15.6和9.3倍;突變株發(fā)酵液粗提物和組分11對(duì)E. faecium CCARM 5203,E. faecalis CCARM 5172和S. aureus CCARM 3090的抗菌活性與野生株相比明顯提高,而且突變株喪失了產(chǎn)生孢子的能力。結(jié)論 wblAyo參與了S. youssoufiensis OUC6819的次級(jí)代謝和形態(tài)分化過程。wblAyo的阻斷激活了S. youssoufiensis OUC6819中抗MDR菌活性次級(jí)代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生,為繼續(xù)挖掘活性化合物提供了必要基礎(chǔ),還為其他海洋鏈霉菌中隱性基因簇的激活提供了參考。

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