多效調控基因wblAyo對海洋鏈霉菌S.youssoufiensis OUC6819次級代謝產物及形態分化的影響
摘要：目的 激活南海紅樹林來源的鏈霉菌Streptomyces youssoufiensis OUC6819中不表達或表達水平低的隱性基因簇,進一步挖掘新穎的次級代謝產物。方法 采用PCR-targeting策略敲除WhiB-like(Wbl)家族的wblAyo基因,通過HPLC分析野生株和突變株發酵產物的差異,檢測發酵液粗提物和C18開放柱層析組分對5種多重耐藥(MDR)菌(Staphylococcus aureus CCARM 3090, Salmonella typhimurium CCARM 8250, Escherichia coli CCARM 1009, Enterococcus faecium CCARM 5203,Enterococcus faecalis CCARM 5172)的抑制活性,通過固體平板實驗和光學顯微鏡觀察鏈霉菌形態分化的改變。結果 得到了正確的ΔwblAyo阻斷突變株,HPLC分析結果表明:與野生株相比,突變株中化合物峰1和2分別提高了15.6和9.3倍;突變株發酵液粗提物和組分11對E. faecium CCARM 5203,E. faecalis CCARM 5172和S. aureus CCARM 3090的抗菌活性與野生株相比明顯提高,而且突變株喪失了產生孢子的能力。結論 wblAyo參與了S. youssoufiensis OUC6819的次級代謝和形態分化過程。wblAyo的阻斷激活了S. youssoufiensis OUC6819中抗MDR菌活性次級代謝產物的產生,為繼續挖掘活性化合物提供了必要基礎,還為其他海洋鏈霉菌中隱性基因簇的激活提供了參考。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系中國海洋藥物雜志社
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