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摘要：埃及伊蚊serpin23（絲氨酸蛋白抑制劑23）在雌蚊唾液腺特異高表達，是蚊蟲唾液組分的主要蛋白之一。本文設(shè)計特異性引物序列，采用RT—PCR技術(shù)擴增獲得埃及伊蚊廣東電白株serpin23成熟肽序列，構(gòu)建重組表達質(zhì)粒pET-28a（＋）-serpin23并測序驗證。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達、KCl染色、切膠純化獲取了目的蛋白；制備了小鼠特異性抗serpin23蛋白多克隆抗體。結(jié)果顯示：獲得serpin23成熟肽序列，全長1197bp，編碼399個氨基酸。等電點pI為6．13，具有serpin結(jié)構(gòu)域和一個功能未知的FAINT結(jié)構(gòu)域。pET-28a（＋）-serpin23重組質(zhì)粒可表達了大小約為47kDa、以包涵體表達為主的融合蛋白。Western Blot結(jié)果證明serpin23重組蛋白可以與抗-His標(biāo)簽和抗-serpin23抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，約47kDa處產(chǎn)生特異性條帶。本研究成功獲得了埃及伊蚊廣東電白株serpin23重組表達蛋白和抗serpin23多克隆抗體，為后續(xù)功能研究奠定基礎(chǔ)。

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