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三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中PRMT1通過C/EBPα調(diào)控c-myc表達(dá)

林群; 劉麗銘; 代輝; 張艷君; 張業(yè) 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京100005

摘要：目的研究在三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT1通過C/EBPα調(diào)控c-myc表達(dá)的機(jī)制。方法在MDA-MB-231細(xì)胞中分別過表達(dá)C/EBPα和敲低PRMT1,在蛋白和mRNA水平檢測(cè)c-myc表達(dá)量;ChIP-qPCR和EMSA檢測(cè)C/EBPα與c-myc啟動(dòng)子的結(jié)合能力;熒光素酶雙報(bào)告基因檢測(cè)PRMT1和C/EBPα對(duì)c-myc啟動(dòng)子的調(diào)控作用。結(jié)果過表達(dá)C/EBPα、敲低PRMT1后,c-myc表達(dá)明顯下降;C/EBPα蛋白3個(gè)甲基化位點(diǎn)35位、156位和165位精氨酸突變?yōu)楸奖彼岷?3RF),C/EBPα對(duì)c-myc啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄抑制明顯減弱。而3個(gè)位點(diǎn)同時(shí)突變成賴氨酸后(3RK),PRMT1對(duì)c-myc的調(diào)控作用消失。結(jié)論在三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中,PRMT1通過甲基化C/EBPα調(diào)控c-myc的轉(zhuǎn)錄。

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