高效液相色譜-串聯質譜法測定肉制品和調味料中7種水產品過敏原
摘要:基于高效液相色譜-串聯質譜系統建立了食品中水產品過敏原的快速篩查和定量檢測方法。樣品經蛋白質提取、純化、胰蛋白酶解后,利用超高效液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質譜(UPLC-Q/Exactive-HRMS)結合ProteinPilot軟件,基于母離子和碎片離子譜分析,實現蛋白質和多肽的鑒定。再通過基本局部比對搜索工具(BLAST)與Uniprot數據庫對比分析,篩選出南美白蝦、大閘蟹、青蟹、金槍魚、大西洋鮭魚的7種過敏原蛋白的30個特征肽。利用高效液相色譜-三重四極桿質譜(UPLC-QqQ-MS)系統對特征肽進行驗證和多反應監測(MRM)定量研究。結果表明,該方法在5~250 mg/kg 范圍內線性關系良好,檢出限為2~3.5 mg/kg ,平均回收率為88.7%~110.2%。該方法重現性好,通量高,可應用于肉制品和調味料中7種過敏原的快速篩查和定量分析。
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