高分辨率熔解曲線檢測結核分枝桿菌對利福平耐藥性研究
摘要：目的評價高分辨率熔解曲線(high resolution melt,HRM)技術檢測結核分枝桿菌對利福平耐藥性的臨床應用價值。方法用傳統結核分枝桿菌藥敏試驗對新疆石河子大學人畜共患病實驗室保存的50株臨床分離菌進行耐藥性檢測。以rpoB基因的利福平耐藥決定區為靶標設計引物進行高分辨率熔解曲線分析,判斷分離出的結核分枝桿菌是否對利福平耐藥。應用SPSS 17.0分析,以傳統結核分枝桿菌藥敏試驗結果為標準,計算兩種方法的符合率。用χ~2檢測分析比例法藥敏結果與高分辨率熔解曲線檢測結果的差異性。用Kappa檢測分析兩種結果的一致性。結果藥敏試驗結果顯示,50株菌中有1株為非結核分枝桿菌;49株中有20株同時對利福平和異煙肼耐藥、1株僅對利福平耐藥;HRM檢測結果顯示,21株對利福平耐藥,28株為敏感株。以傳統藥敏試驗為參考,HRM檢測利福平耐藥性的敏感性為86.36%,特異性為92.59%,經Kappa檢驗顯示,兩種方法檢測結果具有高度一致性。結論 HRM可快速檢測結核分枝桿菌對利福平的耐藥性,具有較高靈敏度,在耐藥結核病的早期診斷上有一定的應用價值。
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