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非對(duì)稱小干擾RNA沉默TACC2基因?qū)Y(jié)直腸癌增殖影響的研究

彭洪; 林中超 南充市中心醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合肛腸科; 四川南充637000

摘要:目的: 本實(shí)驗(yàn)探討靶向沉默TACC2基因的表達(dá)對(duì)人結(jié)直腸癌LoVo細(xì)胞增殖的影響及其主要機(jī)制。方法:采用Western blot檢測(cè)結(jié)直腸癌組織、癌旁正常組織和人結(jié)直腸癌細(xì)胞系LoVo、HCT116及SW480細(xì)胞中TACC2蛋白的表達(dá)。設(shè)計(jì)針對(duì)TACC2基因的siRNA,陰性對(duì)照siRNA-NC及三條長(zhǎng)短不同的非對(duì)稱小干擾RNA[aiRNA(17/24),aiRNA(18/24) 及aiRNA(19/24)]。PCR檢測(cè)各組對(duì)TACC2基因的沉默效果。MTT法檢測(cè)siRNA,siRNA-NC和aiRNA(17/24)各組細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)3組細(xì)胞周期的變化。 結(jié)果: TACC2在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織。人結(jié)直腸癌細(xì)胞系LoVo中TACC2蛋白的表達(dá)明顯高于HCT116和SW480細(xì)胞系。aiRNA(17/24)在各組中有最強(qiáng)的基因沉默效果。與siRNA和siRNA-NC組相比,aiRNA(17/24)組細(xì)胞增殖能力明顯降低( P 〈0.05),處于細(xì)胞周期G 2/M期的細(xì)胞數(shù)量明顯增多( P 〈0.05)。 結(jié)論: 基于TACC2基因的特異性非對(duì)稱RNA干擾在沉默效率上優(yōu)于傳統(tǒng)siRNA,TACC2可能是治療結(jié)直腸癌的一個(gè)重要靶點(diǎn)。

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