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加急見(jiàn)刊

應(yīng)用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選GbVWR互作蛋白

王雪娟; 楊君; 張艷; 閻媛媛; 馬峙英; 王省芬 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)教育部華北作物種質(zhì)資源研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)學(xué)院; 河北保定071001

摘要：前期研究表明海島棉（Gossypium barbadense）GbVWR（Verticillium wilt resistance）基因參與了棉花抗黃萎病反應(yīng)，但其抗病機(jī)制尚不清楚。本試驗(yàn)利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選GbVWR互作蛋白，并通過(guò)對(duì)互作關(guān)系的分析初步探討其介導(dǎo)的棉花抗病機(jī)制。結(jié)果表明：本研究成功構(gòu)建了酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-GbVWR，并利用PEG/LiAc法將其轉(zhuǎn)化至酵母菌株Y2HGold感受態(tài)細(xì)胞中，結(jié)果顯示重組質(zhì)粒無(wú)自激活活性及毒性；用攜帶誘餌載體pGBKT7-GbVWR的酵母菌株與黃萎病誘導(dǎo)的海島棉Pima90-53酵母雙雜交cDNA文庫(kù)進(jìn)行雜交，通過(guò)PCR、測(cè)序和數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)分析插入的基因片段，共篩選到24個(gè)與GbVWR潛在互作的蛋白，為進(jìn)一步探明GbVWR的抗病功能提供了理論依據(jù)。

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