miR-4279通過靶向Gli1調控宮頸癌的發生發展
摘要:目的探討miR-4279在子宮頸癌的增殖過程中的作用及其作用靶點。方法利用q RT-PCR比較miR-4279在正常宮頸上皮細胞和宮頸癌細胞系He La和C-33A中的表達水平;通過轉染miR-4279的模擬物或抑制物的方法來過表達或敲低miR-4279;通過miR-4279靶基因預測網站miRanda和Targetscan,尋找miR-4279的靶基因;通過免疫印跡來檢測Gli1的蛋白水平,利用熒光素酶報告系統來檢測Gli1 3’-UTR的活性,明確Gli1是否為miR-4279的靶基因。結果 (1)與正常宮頸上皮細胞(1.00±0.02)相比,miR-4279在宮頸癌細胞系He La(0.54±0.10)和C-33A(0.48±0.08)中表達顯著較低(P〈0.001);(2)網站預測結果顯示,Gli1為miR-4279的潛在靶基因;(3)過表達miR-4279下調Gli1的蛋白水平,抑制miR-4279上調Gli1的蛋白水平;(4)過表達miR-4279導致結合Gli1的3’-UTR的能力(1.30±0.03)顯著高于對照組(1.00±0.01)(P〈0.01),抑制miR-4279導致結合Gli1的3’-UTR的能力(0.43±0.02)顯著低于對照組(1.00±0.06)(P〈0.001)。結論 miR-4279能夠通過Gli1調控宮頸癌的發生發展,是一種潛在的抑癌因子。
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