作者：李向陽，朱宇同，王艷芳，符林春，黃真炎，黃進梅，邢基斯，王冠軍

【關鍵詞】 青蒿油 摘要：【目的】比較青蒿油納米脂質體和青蒿油的體外抑菌作用。【方法】通過制備不同濃度的青蒿油和青蒿油納米脂質體的藥物培養基，分別觀察其對痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌和糠秕孢子菌的抑菌效應。【結果】青蒿油納米脂質體的最低有效濃度為0648mg／L，而陽性對照藥青蒿油的最低有效濃度為648mg／L，在0648mg／L濃度時僅對金黃色葡萄球菌有抑制作用。【結論】通過納米脂質體的制備工藝，可以增強青蒿油的抑菌療效，減少用藥量。 關鍵詞：青蒿油納米脂質體；青蒿／治療應用；痤瘡，尋常／中藥療法； 丙酸桿菌，痤瘡／藥物作用；葡萄球菌，金黃色／藥物作用；真菌／藥物作用； 工藝學，制藥 痤瘡為常見的慢性皮囊皮脂腺炎癥性皮膚病，發病率高，90%以上青春期男女可有不同程度的皮損，嚴重者可引起毀容，15%患者因病情較重需要治療。其發病主要與激素水平異常、皮脂腺分泌調節紊亂、微生物感染等有關。條件致病菌是產生痤瘡的中心環節，皮脂毛囊中存在痤瘡丙酸桿菌、金黃色葡萄球菌及糠秕孢子菌三種致病菌。因此，治療痤瘡的藥物應該具有抑制三種致病菌的作用。而青蒿油納米脂質體具有易于粘附，可增加藥物的接觸面積和接觸時間，提高作用部位的藥物濃度，增強藥效等優點。因此本實驗將青蒿油制成納米脂質體，采用試管藥基法觀察其對痤瘡三種病原菌的抑制作用，并與青蒿油的作用進行比較。 1 材料與方法 11 實驗材料 111 藥物 青蒿油由四川酉陽制藥廠提供，含量為36g／L，批號：20001103，原液為微酸性，不溶于水及酒精，而微溶于吐溫80。 112 主要儀器 旋轉蒸發儀由上海醫科大學儀器廠提供，型號：XW80A；超聲波粉碎機由寧波新芝科器研究所生產，型號：JY96Ⅱ；電子光學顯微鏡由日本奧林巴斯光學工業株式會社提供，型號：CK40SL；恒溫培養箱由美國謝爾登公司提供，型號：HS2323。 113 試劑 大豆卵磷脂由廣東環凱生物科技公司分裝，批號：200106450，純度82%；脫氧膽酸鈉由中國醫藥集團上海化學試劑公司提供，批號：20010518；氯仿由天津化學試劑有限公司提供，批號：20010808，分析純；甲醇由天津市四友生物醫學技術公司出品，批號：20011108，分析純。 114 菌種 痤瘡丙酸桿酸由北京市藥檢所提供；金黃色葡萄球菌由北京市藥檢所提供；糠秕孢子菌由廣東省皮膚病防治所提供。 12 實驗方法 121 青蒿油納米脂質體的制備 取大豆卵磷脂275g，脫氧膽酸鈉075g，青蒿揮發油18mL，置梨形瓶中，加入氯仿―甲醇(1∶1)溶解；旋轉蒸發后除去溶劑，使磷脂等在瓶壁形成均勻的薄膜，然后在燒瓶中加入1539mmol／L氯化鈉水溶液至20mL，振搖后即得柔性脂質體粗混懸液，在冰水浴條件下探針式超聲5～10min，便可得納米脂質體膠體溶液［1］，最后在燒瓶中加入1539mmol／L氯化鈉水溶液至100mL即可。 122 制備青蒿油納米脂質體的標準 (1)上述所得溶液放置30min后，沒有分層、沉淀；(2)上述溶液，可以通過045μm醋酸纖維膜；(3)在電子光學顯微鏡高倍鏡下觀察發現其微小顆粒直徑都小于100nm，已基本達到了納米技術水平(圖1)。 123 試管藥基法 為測定青蒿油和青蒿油納米脂質體分別對三種菌的最低抑菌濃度，從藥物原液開始，按V青蒿油∶VLB肉湯為1∶100和V青蒿油納米脂質體∶VLB肉湯為1∶100制成648mg／L的藥物混懸液，用無菌的LuriaBertani(LB)肉湯作10倍遞減稀釋至000648mg／L。 13 實驗程序及操作 131 藥基制備 取營養瓊脂33g，酵母水解物05g，置三角燒瓶中，加蒸餾水100mL，充分混勻，調pH至74，加熱至瓊脂完全融化后分裝，每只試管分裝18mL，分別加入各濃度青蒿油或青蒿納米脂質體02mL，加塞、標記。 132 對照設置 設普通培養基斜面作為對照管。 133 高壓滅菌