作者：瑪依拉·買買提依明，滿爾哈巴·海如拉，于睿，楊偉俊

【摘要】 目的建立新疆圓柏葉藥材質量標準。方法采用顯微鑒別法、理化鑒別法、薄層色譜法、揮發油測定法進行定性鑒別。結果建立了簡便、靈敏、重復性好的鑒別方法。結論為有效評價新疆圓柏葉質量提供依據。

【關鍵詞】 新疆圓柏葉; 維吾爾醫藥; 質量標準

本品為柏科(Cupressaceae)植物新疆圓柏Sabina vulgaris Antoine的干燥枝葉，多年生小灌木，喜生于沙石的山坡上。新疆圓柏枝葉為維吾爾族習用藥材，維吾爾語名為“Arqa yopurmige”，漢語名為“新疆圓柏葉”。我國主產于新疆，亦產于青海、江西、內蒙古等地;國外俄羅斯、蒙古、巴基斯坦、北歐、伊朗等地亦有分布。嫩枝葉和果實是新疆圓柏的主要藥用部位。新疆圓柏作為一種天然植物，在新疆廣大地區均有生長，其自然資源十分豐富，含有多種化學成分如黃酮類、揮發油類、萜類、木質素類等，具有多種生理功能和藥用價值如抗腫瘤作用、心血管系統作用等，具有驅風鎮靜、活血止痛等功能，用于風濕性關節炎，小便不利，迎風流淚，視物不清等[1]。 維吾爾醫臨床用于風寒頭痛、風濕性關節炎等疑難病癥的治療[2]。國內學者對新疆圓柏葉的研究主要集中在對其化學成分及生理活性的研究上，對其質量標準研究未見文獻報道，目前國家標準和地方標準均未見收載。因此，為了給該藥材的質量評價提供理論依據，我們對新疆圓柏葉藥材進行初步研究并起草了其質量標準。

1 材料與儀器

1.1 材料新疆圓柏枝葉藥材采自新疆石河子清水河，由新疆藥物研究所張彥福研究員鑒定為柏科植物新疆圓柏Sabina vulgaris Antoine的干燥葉。

1.2 試劑蘆丁對照品(批號080409， 上海融禾醫藥科技有限公司);硅膠G預制板(青島海洋化工廠分廠);水為蒸餾水，乙醇等其它試劑均為分析純。

1.3 儀器OLYMPUS CX31型照相顯微鏡(北京泰克儀器有限公司，型號7K13884);旋轉蒸發儀(鞏義市子華儀器有限公司，型號RE-501);電子天平(余姚紀銘稱重校驗設備有限公司，型號10002);分析天平(賽多利斯科學儀器北京有限公司，型號D000000246); DHG-9070A型電熱恒溫鼓風干燥箱(上海齊欣科技儀器有限公司);揮發油提取器;ZF-20D暗箱式紫外分析儀(鞏義市予華儀器有限責任公司)。

2 方法與結果

2.1 性狀鑒別本品多分枝，小枝扁平，枝灰棕褐色，老枝暗褐色，光滑。葉交互對生;菱形或菱狀卵圓形，葉細小鱗片狀，鱗葉相互緊覆，長1～2.5 mm，先端鈍或微尖，全緣，下面中部生有橢圓形腺體，刺形葉生于幼齡植株上，有時壯齡植株亦有少量刺形葉，排列緊密，向上斜伸不開展，長3～7 mm，上而凹入，中肋明顯，被白粉。葉貼伏于枝上，深綠色或黃綠色。質脆，易折斷。氣清香，味苦澀、微辛。

2.2 顯微鑒別

2.2.1 切片的制作方法取材→軟化→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→粘貼→脫蠟→染色制片→封藏→貼標簽。

2.2.2 嫩枝橫切面呈橢圓形，中央為小枝部分，兩側為鱗片狀葉。鱗葉表皮細胞1列，排列整齊，外被厚角質層;鱗葉中部有較大的類圓形或橢圓形的空腔;葉肉柵欄細胞短柱狀，海綿組織細胞較大、排列疏松;小枝部下皮細胞類長方形，排列整齊，木質部由管胞組成;中央髓部扁小，髓射線明顯。見圖1。1.表皮細胞 2.葉肉組織 3.小枝韌皮部4.小枝木質部 5.小枝髓部圖1 圓柏葉橫切

2.2.3 粉末裝片制作方法將藥材研粉→過60目篩→置載玻片上→加水合氯醛1～2滴透化→加甘油1~2滴→鹽酸間苯三酚染色→裝片→顯微下觀察。

2.2.4 粉末特征粉末綠色，表皮細胞類長方形，長47.5～125 μm，寬為12.5～25μm;氣孔甚多，凹陷形，保衛細胞較大，長徑約為50μm;纖維細長，單個或成束，直徑約7.5～20μm;木薄壁細胞多見，長為30～72.5μm，寬為17.5～42.5μm。見圖21.木薄壁細胞 2 .表皮細胞 3.纖維 4.氣孔圖2 圓柏葉粉末

2.3 理化鑒別取本品粗粉(過20目篩)0.5g，加甲醇5ml，振搖后浸漬1h，濾過，濾液供下述實驗：①取濾液1ml，加三氯化鐵試液1～2滴，溶液變為墨綠色。②取濾液1ml，加5%亞硝酸鈉和5%硝酸鋁各5滴，混勻，加5%氫氧化鈉溶液5滴，溶液變為紅色。

2.4 薄層鑒別

2.4.1 對照品溶液的制備取蘆丁對照品1.5 mg，加甲醇10 ml制成0.15 mg/ml的對照品溶液。

2.4.2 供試品溶液的制備取本品粗粉1 g，加40 ml 50%甲醇，在80℃水浴加熱回流提取1 h， 乘熱過濾，水浴蒸干，殘渣用20 ml熱水溶解，置分液漏斗中，第1次用石油醚(60~90 ℃)20 ml萃取;第2次用醋酸乙酯30 ml萃取;第3次用正丁醇30ml萃取，水浴蒸干，殘渣加2 ml甲醇溶解，作為供試品溶液[3]。照薄層色譜法試驗[4]，取正丁醇部分樣品及蘆丁對照品(0.15 mg/ml)各2μl點于硅膠G預制板上，用醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1.5∶0.5)展開，取出涼干，用1%三氯化鋁乙醇溶液顯色，置紫外燈(365 nm)觀察，結果樣品與對照品在同一位置上顯相同顏色的熒光斑點。見圖3。1～3.正丁醇供試品溶液 4.蘆丁對照品溶液圖3 圓柏葉薄層鑒別

2.5 揮發油測定照揮發油測定法(《中國藥典》2005年版Ⅰ部，附錄X D)測定[4]， 取新疆圓柏枝葉粗粉150 g(過20目)，置1 000 ml圓底燒瓶中，加600 ml水，加數粒玻璃珠，置電熱套中，接的揮發油提取器及冷凝管，加熱回流提取揮發油，并保持微沸約5 h，得3.8 ml揮發油，2.53%(ml/g)。暫定本品揮發油含量不得少2%(ml/g)。

3 討論

本研究首次對新疆圓柏葉藥材進行了質量標準初步研究，為控制藥材內在質量、為進一步開發利用新疆圓柏葉資源奠定基礎。

根據文獻[2]報道，從新疆圓柏的醋酸乙酯部位中分離得到了蘆丁等9個黃酮類化合物，因此我們選用蘆丁為對照品，建立了黃酮薄層色譜檢查項，進行了薄層鑒別試驗，結果該鑒別方法簡單、薄層色譜斑點清晰、顯而易見、重復性好。在薄層分離過程中，曾用3種展開劑進行薄層層析分離，但醋酸乙酯部位在前2種展開劑中與對照品溶液相同位置無相同的斑點，正丁醇部位在前2種展開劑中與對照品溶液有相同的斑點，但展開效果不夠理想，因此再次調整展開劑的比例，改用第3種展開劑后，展開效果明顯改善，正丁醇萃取部位與對照品色譜相應位置上顯相同顏色的斑點。

根據文獻[5]新疆圓柏枝葉含有揮發油成分，該植物具有濃郁芳香氣味，維吾爾藥的功效體現在多種成分的協調作用上。因此為控制該藥材內在質量，以測定揮發油含量為考察指標，對其進行揮發油含量測定，暫定本品揮發油含量不得少于2%(ml/g)。

該質量標準研究過程中，只收集到一批藥材并僅對其性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別、薄層鑒別、揮發油測定進行初步探討，今后還需要逐步擴大樣本量且進一步補充、完善其它鑒別、檢查項，才能全面反映各地藥材的質量信息。