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虎奶菇和虎乳靈芝的生藥鑒定

楊蘭 房志堅

【摘要】 目的建立虎奶菇和虎乳靈芝兩種菌類藥材的生藥鑒定方法。方法從形態特征、顯微特征、理化性質方面對虎奶菇和虎乳靈芝兩種真菌進行系統觀察和鑒別,采用紫外-可見光譜(UV-Vis)法對兩種真菌的乙醇提取物進行表征區分。結果兩者在形態特征、顯微特征、理化性質、紫外吸收方面均呈現出不同。結論該鑒定方法操作簡便,重復性好,測定結果準確,可作為虎奶菇和虎乳靈芝兩種菌類藥材的鑒定依據。

【關鍵詞】 虎奶菇 虎乳靈芝 生藥鑒定

Abstract:ObjectiveTo evaluate the identification methods for the sclerotium of Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing and Lignosus rhinoceros(Cooke) Ryv.MethodsTo overall survey and distinguish the two Rinds of fungus on morphological, microscopic identification,physical and chemical character,and to determine the absorption of the ethanol extract by UV-Vis spectra.ResultsThe two kinds of fungus were distinct on morphologic, microscopic identification,physical and chemical character,and UV absorption.ConclusionThe method is simple and accurate,which can be used for identification of the sclerotium of Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing and Lignosus rhinoceros(Cooke) Ryv.

Key words:Pleurotus tuber-regium (Fr.) Sing; Ligrosus rhinoceros (Cooke) Ryv.; Identification 虎奶菇為側耳科植物虎奶菇Pleurotus tuber-regium(Fr.) Sing的菌核,是產于熱帶和亞熱帶地區的一種珍稀食藥用菌,主產于非洲,在我國只分布于少數地區,如云南省藤沖、章風兩縣。具有提高人體免疫力、止咳等功效[1]。 虎乳靈芝,為多孔菌科虎乳靈芝Lignosus rhinocerus(Cooke)Ryv的菌核,主要分布于中國、馬來西亞、菲律賓、斯里蘭卡、澳大利亞和其他國家(東非),我國主要分布于海南省保亭黎族自治縣,具有治療肝癌、慢性肝炎、肝熱、胃病的作用[2]。 虎奶菇和虎乳靈芝兩種菌類藥材有一定的相似性,到目前為止還未見二者的生藥鑒定標準。本研究擬通過對虎奶菇和虎乳靈芝進行生藥鑒定,從性狀特征、顯微特征、理化性質等方面進行比較,并用UV-Vis光譜手段進行表征區分。

1 材料和儀器

1.1 材料 虎奶菇由廣東國康科技實業有限公司提供,經廣東藥學院房志堅副教授鑒定;虎乳靈芝購于香港,由廣東藥學院房志堅副教授鑒定。

1.2 儀器 日本島津紫外分析儀(Shimadzu2450型);麥克奧迪數碼顯微系統(BA300+Maticam3.2型)。

2 方法與結果

2.1 性狀鑒別虎奶菇菌核呈不規則團塊,類圓形或扁球形,大小不一,直徑3~6 cm,厚2.5~4.5 cm。表面多黃白色,少數淺黃色,外皮薄且多粗糙,有明顯的皺縮紋理,偶見細小橫裂紋,或有瘤狀突起。體輕,質松,入水能浮于水面,斷面不平坦,白色或黃白色,有顆粒性。氣微,味淡,嚼之有顆粒感,微黏性。見圖1。 虎乳靈芝菌核多為不規則塊狀或扁球形,大小不一,差異較大,直徑1~5 cm,厚1~3 cm。表面呈灰褐色,外皮薄且多粗糙,有不規則裂紋。有瘤狀突起及斷續的縱皺,偶有空洞。質地堅硬,不易折斷。斷面不平坦,類白色,呈顆粒性,多浮于水面,少數下沉。氣微,味淡,嚼之帶黏性。見圖2。

圖1 虎奶菇(菌核)(略)

圖2 虎乳靈芝(菌核)(略)

2.2 顯微鑒別

2.2.1 虎奶姑粉末菌核粉末灰白色,多粘附在一起,味淡。粉末用水裝片,載玻片上水溶液中的粉末多相互粘附,顯微鏡下可見淺黑色的不規則團塊,邊緣可見無數菌絲露出,無色菌絲相互纏繞成團塊。粉末用5%氫氧化鉀液裝片,團塊溶化,露出菌絲。見圖3~4。

2.2.2 虎乳靈芝粉末粉末灰白色,味淡。粉末用水裝片,顯微鏡下可見類圓形多糖團塊,中間透明,邊緣近黑色,無色菌絲,相互纏繞附著在上面。粉末用5%氫氧化鉀液裝片,團塊溶化,露出菌絲。見圖5~6。

圖3 虎奶菇水裝片(略)

圖4 虎奶菇5%氫氧化鉀液裝片(略)

圖5 虎乳靈芝水裝片(略)

圖6 虎乳靈芝5%氫氧化鉀液裝片(略)

2.3 理化鑒定準確稱取虎奶菇和虎乳靈芝粉末各10 g,置于250 ml三角瓶中,加入50 ml的95%乙醇,浸提24 h,將所得提取液置于通風櫥中自然揮發近干。以石油醚-醋酸乙酯(7∶3)混合溶液為展開劑,以10%硫酸-乙醇為顯色劑進行TLC實驗。 如圖7~8所示,左邊為虎奶菇的乙醇提取液點樣,右邊為虎乳靈芝的乙醇提取液點樣。

圖7石油醚-醋酸乙酯(7∶3)展開后(略)

圖8 10%硫酸-乙醇顯色后(略) 展開后,365 nm下,虎奶菇和虎乳靈芝各有一個藍色熒光斑,Rf值分別為0.75和0.72,虎奶菇的熒光斑較強(圖7)。顯色后,在365 nm下觀察,虎奶菇被分離的斑點數為3,從上到下Rf值分別為0.75,0.71,0.5,均為綠色熒光斑,Rf值為0.75的斑點熒光較強;虎乳靈芝被分離的斑點數為1,Rf值為0.72(見圖8)。

2.4 紫外-可見(UV-Vis)光譜分析分別稱取虎奶菇、虎乳靈芝藥材粉末30 g,置于250 ml三角瓶中,用石油醚(60~90℃)超聲提取3次,所得藥渣置于通風櫥中揮干。再用60%乙醇加熱回流提取,提取液減壓濃縮,蒸干。殘渣用乙腈溶解,過濾,所得濾液為樣品溶液,以乙腈試劑為參比做紫外-可見光譜掃描,掃描波長范圍:190~700 nm(見圖9~10及表1)。

3 討論 兩者顯微特征有較大差別?;⒛坦降木z多數粗短,分枝,相互纏繞成團塊;而虎乳靈芝的菌絲多數細長,不分枝,纏繞及附著于類圓形分泌物上。 薄層色譜結果表明:虎奶菇至少含有4種或4種以上的親脂性的甾體或萜類成分,虎乳靈芝至少含有兩種或兩種以上的親脂性的甾體或萜類成分。

圖9 虎奶菇的UV-Vis光譜圖(略)

圖10 虎乳靈芝的UV-Vis光譜圖(略)

表1 UV-Vis光譜數據nm(略)

紫外吸收光譜表明,虎奶菇和虎乳靈芝的吸收帶3均為皂苷含孤立雙鍵的苷元的貢獻。

【參考文獻】 [1] 江枝和,李三暑,鄭永標,等.虎奶菇菌核和子實體微量元素及氨基酸分析[J].食用菌學報,2000,7(2):47. [2] 黃年來.一種藥用菌-虎乳靈芝學名的鑒定[J].食用菌學報,1999,6(1):30.

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