【摘要】 目的研制紫草燒傷噴霧劑并進行初步藥效學實驗。方法選擇最優工藝制備紫草燒傷噴霧劑，對其有效成分左旋紫草素進行定性鑒別和含量測定作為質量控制，采用實驗性燒燙傷模型考察噴霧劑的治療作用。結果工藝流程合理，制劑質量穩定，質檢方法可控；動物實驗表明，其具有抗炎促進創傷愈合的作用，縮短燙傷愈合時間顯著提高。結論 紫草燒傷噴霧劑工藝合理 ，質量可控，對燒燙傷具有治療作用。

【關鍵詞】 紫草； 燒傷噴霧劑； 藥效學

紫草為紫草科植物新疆紫草或內蒙紫草的干燥根，春秋二季采挖除去泥沙干燥面得新疆紫草（軟紫草）Arnebia euchroma Royle主產于新疆西藏等地區；紫草（硬紫草）主產于黑龍江、吉林、遼寧、河北、湖南、廣西等省區；內蒙紫草主產于內蒙古。紫草是我國的常用的中草藥，味甘、咸、性寒、歸心、肝經。具有涼血、活血，解毒透疹等功效。《本草綱目》曰：紫草“治斑疹。斑毒，活血涼血，利大便”。研究表明紫草還具有抗炎、抗過敏和影響免疫功能等作用［1］，其主要成分紫草紅色素還是5種天然紅色素中最好的一種，《中國藥典》收載的品種為新疆紫草或蒙紫草的干燥根［2］。新疆紫草含萘醌色素化合物為4.40%～6.99%，主要功能有：涼血、活血、解毒透疹，用于血熱毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、瘡瘍、濕疹、水火燙傷［2］。

現在臨床廣泛使用的紫草燒傷膏是在中醫藥理論指導下，充分發揮中醫藥治療燒傷創瘍的優勢，應用于治療燒傷創瘍 ，由于膏劑使用不便，本課題在傳統處方的基礎上經過優選、重新組方、改變劑型形成新劑型的紫草燒傷噴霧劑。為燒傷的治療提供新劑型。

1 器材

1.1 儀器 WS70紅外線快速干燥器（上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司）、GZXDH40X45電熱恒溫干燥箱（上海市躍進醫療器械一廠）、恒溫水浴鍋（余姚亞星儀器儀表有限公司）、旋轉蒸發儀（上海申生科技有限公司）、島津UV2401PC紫外-可見分光光度計（日本島津），TGL16G高速離心機（上海安亭）。

1.2 原料與試劑

紫草、蒲公英、黃柏、冰片、乙醚、吐溫80，蜂蠟，乙醇，硅膠G ，CMCNa，大豆油。

2 方法與結果

2.1 制備工藝［3］

2.1.1 處方組成紫草、蒲公英、黃柏、冰片等。

2.1.2 制法

取麻油加熱；先后加入粉碎過的蒲公英、紫草，過濾。黃柏粉末用乙醇進行回流、蒸發、抽濾、調pH，抽濾后加入到已融化的蜂蠟中，充分攪拌后加到前面所得到的紫草油中，取冰片，溶于乙醚中，攪拌均勻即可。

2.2 質量標準研究［4，5］

2.2.1 左旋紫草素的含量測定

對照品溶液的制備：精密稱取左旋紫草素標準品5.0 g，置于100 ml的容量瓶中，加入乙醇定容，即得到溶液濃度為0.05 mg/ml對照品標準液，貼標簽放置備用。

供試品的制備：精密量取樣品液0.5 ml，置于50 ml容量瓶中，定容，搖勻后即得供試品溶液，貼標簽放置備用。

測定波長的選擇 ：參考文獻［4］以乙醇作為空白對照，將配制成一定濃度的供試品溶液和對照品標準液在波長400～600 nm范圍內掃描，結果供試品溶液和對照品標準液均在516 nm處出現最大吸收峰，因此測定波長選擇為516 nm。

標準曲線制備：精密吸取0.05 mg/ml左旋紫草素對照品標準液1，2，3，4，5 ml，分別置于10 ml容量瓶中，用乙醇定容；以乙醇做空白對照，在516 nm處測定其吸光度，以吸光度為縱坐標，左旋紫草素對照品標準液濃度為橫坐標進行回歸，回歸方程為：A=18.771C+0.006 2，r=0.999 9，（r=5），左旋紫草在5～25 μg/ml濃度范圍內線性關系良好。

穩定性實驗：精密吸取供試品液適量，分別在0，0.5，1，2，3，4 h內重復測定其吸光度，所得RSD為1.8%，說明該供試品在4 h內穩定。

精密度考察：取供試品溶液，按含量測定項下測定5份，RSD為0.93%。

加樣回收率實驗 ：精密吸取1.5 ml供試品液，置于10 ml容量瓶中，加入適量0.062 mg/ml的左旋紫草素定容后測定含量。計算回收率，結果見表1。表1 加樣回收率實驗（略）

樣品的含量測定 ：精密吸取供試液0.5 ml，加入乙醇定容至50 ml，乙醇做空白對照，于516 nm波長處測定其吸收度，帶入標準曲線方程，計算含量，測得供試品中左旋紫草平均含量C=15.3%。 2.2.2 TLC鑒別實驗 取適量樣品0.5 ml，加95%乙醇5 ml， 搖勻后放置得樣品液；另取陰性對照品0.5 ml，加 95%乙醇5 ml，搖勻放置后得空白液。以左旋紫色素為標準對照品，加乙醇配制成每毫升含 0.5 mg的標準品溶液。各取10 μl點于硅膠薄層板上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲酸(5∶1∶0.1)為展開劑上行展開，晾干置紫外燈518 nm觀察，樣品液與對照品在相應位置上顯紫紅色斑點。

2.3 刺激性實驗

將紫草噴霧劑噴在剃去毛的家兔皮膚上(5.0 ml)，24 h后觀察無紅腫刺激現象出現。

2.4 藥效學實驗［6］

2.4.1 動物燙傷模型的建立

選用小鼠30只，清潔級，封閉群，體重在18～22 g左右，雌雄不拘。先涂上硫化鋇糊劑，5 min后用玻璃棒輕輕刮去脫毛劑，再用清水將脫毛區洗凈擦干即可。用70℃熱水浸燙脫毛區15 s達淺Ⅱ度燙傷，80℃熱水浸燙15 s達深Ⅱ度燙傷。

2.4.2 藥物對小鼠的愈合作用

將30只大鼠隨機分成6組，每組5只，分別為淺Ⅱ度燙傷和深Ⅱ度燙傷的紫草噴霧劑組，京萬紅治療組和空白對照組。所有動物用0.3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，按照各組給藥配方給藥，紫草噴霧劑治療組、京萬紅治療組和空白對照組每日給藥兩次，觀察動物的愈合時間及愈合面積。結果見表2。表2 藥物對燙傷小鼠的愈合作用（略）表3 藥物對淺Ⅱ度燙傷小鼠的治療效果（略）

脫痂率=脫痂面積創面初始面積×100%

愈合率=愈合面積創面初始面積×100%

體征表現：給藥1周時，空白對照組大鼠食欲不振、消瘦，體重明顯減輕，其余各組食欲正常，活動自如，體重略有增加，無死亡情況。

愈合情況

紫草噴霧劑組：用藥后3 d，3組大鼠的創面明顯減少，7 d后有肉芽組織生成，20 d后多數大鼠創面基織生成；愈合創面有鼠毛長出。

空白對照組：創面膿汁較多、感染較重，更無肉芽組，7 d后有肉芽組織生成，20 d后多數大鼠創面基織生成，20 d后仍未愈合，或有小條狀疤痕。25 d后處死所有的動物，并記錄實驗數據及現象。

實驗表明：紫草噴霧劑組和空白對照組相比較，能迅速形成藥痂，使水腫消退，明顯促進創面愈合，療效與京萬紅相當。

3 討論

在紫草油的制備過程中應密切注意大豆油溫度的控制，在薄層層析實驗中，使用95%乙醇作為提取溶劑效果最佳，若使用甲醇，75%乙醇和無水乙醇，其效果均次于95%乙醇；同時考慮乙醚，氯仿，石油醚等其他有機溶劑，但考慮到在展開過程中凡士林在這3種溶劑中溶解度較大，影響測定結果，因此選擇95%乙醇作為提取溶劑。

紫草燒傷噴霧劑組和空白對照組相比較，能形成藥痂速度快，使水腫迅速消退，并明顯促進創面愈合，紫草燒傷噴霧劑組和京萬紅藥品對照組相比較，兩組愈合時間相似，但兩組脫痂時間不同，紫草燒傷噴霧劑組時間較短。紫草噴霧劑噴射在新鮮創面后，經3～5 min可形成一層透明藥膜，再重噴2～3次，增厚藥膜不致破裂，可促使藥痂形成并保留完整。形成的藥痂能阻斷污染、細菌感染和外來刺激。對燙傷具有明顯治療作用，具有很好的醫用價值。

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