【關鍵詞】 方劑；組織代謝藥理學；血清藥理學；高效液相色譜

方劑藥效學是方劑研究的核心之一，但其作用的確切成分不清、途徑不明、靶點不定。目前，人們主要以血清藥理學進行體外研究，雖取得一定的進展，但沒有深入到病變靶組織。現代醫學認為，藥物的靶組織濃度與療效密切相關。方劑中有效成分經過吸收進人血液后到達病變靶組織并發揮作用；因此，用組織代謝藥理學的方法尋找方劑有效成分在體內的作用靶點，以闡明中藥方劑的藥效物質基礎及其作用途徑；結合中醫學整體觀，用整體分析方法研究方劑作用靶點，并提出方劑組織代謝藥理學的新假說，以促進方劑藥效物質基礎和作用途徑的研究。

1 方劑藥效學研究方法的認識

方劑口服或灌腸后經過腸道和肝臟的首關效應，被吸收進入體內血液的成分很多，不同方劑的藥動學(PK-PD)不同，經過吸收、分布、代謝和排泄過程后可能產生新的化學成分，在體內具有不同的組織分布，但不是所有這些血清成分都具有藥理作用和生物活性[1]。因此，方劑在體內真正的有效成分是什么是最先需要解決的問題，最后到達病變組織對疾病起治療作用的成分才是真正的中藥有效成分。因此，不僅要研究用藥后的血藥濃度水平，更要研究病變靶組織內的中藥成分譜及其濃度水平，尋找真正的中藥有效成分。

2 目前方劑藥效學研究的局限性

目前進行方劑藥效學、藥動學研究的主要方法有血藥濃度法、生物效應法，研究其血藥濃度和尿中排泄速率與療效的關系，主要選擇一些不能量化的間接指標，或者尋找體內的單體成分。血清藥理學是使用含藥血清代替方劑粗提物進行藥理研究的體外實驗方法，較客觀真實地反映方劑的藥理藥效及其作用機制，通過藥理效應來反映方劑有效成分的體內動力學規律，但它是在體外進行的間接試驗，不能準確尋找和確定方劑在體內代謝過程中的活性成分，更不能說明方劑體內直接作用的成分譜或病變組織內的靶成分譜[2]。方劑是一個多元、復雜體系，化學成分復雜，很難用其中某一成分的藥效或藥代參數來代表整個方劑的參數[3]。單一成分不能說明配伍的影響，也不能代表方劑，不符合中醫整體觀和辨證論治的思想。如用于治療急性胰腺炎的大承氣湯以大黃、厚樸為主藥，大黃含有大黃酸、大黃素、大黃酚等，厚樸中含有厚樸酚、厚樸新酚等，枳實含有生物堿、黃酮苷及揮發油等成分，臨床效果確切，動物實驗也得到證實。給香豬急性胰腺炎模型使用清胰湯后，采用HPLC法檢測到香豬門靜脈和腔靜脈中含有大黃素，且在一定濃度范圍內與相應的峰值呈良好的線性關系[4]。證明口服或灌腸后方劑的某些成分能夠吸收進人體內，但方中多種主要成分的血清濃度水平如何，進人血液內的成分能否到達病變組織并發揮作用，還有待進一步研究。

3 方劑配伍的藥理學研究

方劑中每一味藥對其它藥的有效溶出和吸收有明顯影響，療效也顯著不同，臨床上也呈現出顯著的量效關系。如大承氣湯不同煎法，或加減方劑中的藥味和劑量，會明顯影響總游離蒽醌含量，且含量隨厚樸、枳實煎煮時間的增加而增加；而芒硝也明顯影響各有效成分的溶出；枳實能影響厚樸有效成分厚樸酚的溶出[5]。這些煎劑的不同溶出率明顯影響有效成分的吸收。大承氣湯經過煎煮，口服或灌腸等途徑治療具有陽明腑實證的急性胰腺炎過程中發生吸附、絡合、分解、沉淀等變化后，方劑在消化道和肝臟的代謝及消化道內的吸收不同。大黃素、大黃酸、大黃酚、厚樸酚等被吸收入血后能否達到治療濃度水平，并進一步在病變胰腺組織內分布？究竟是哪一種或幾種主要成分起作用？即研究大承氣湯的中藥方劑血清藥理學、組織藥理學，并探討方證相關性。

4 方劑藥效學研究的新方法——組織代謝藥理學

中藥藥理藥效研究以觀察療效的“黑箱”法為主，將黑箱定位于血清。因此，中藥(方劑)血清藥理學受到重視，卻多以檢測單體成分的體外實驗為主，沒有進行在體的方劑血清藥理學研究[6]；進行了效應器官活性成分譜與中藥歸經理論研究，但沒有研究方劑的有效成分在靶器官內的濃度和組織病理學及療效的關系研究，因此，有必要重新對“黑箱”進行定位，并進行病變靶組織的藥理學研究，即方劑組織代謝藥理學。

方劑組織代謝藥理學是以中醫基本理論為指導，用藥理學的方法研究方劑有效成分對病變靶組織的影響及其作用機理的科學。運用HPLC、LC-MS等現代藥理學、病理學方法研究不同方劑在不同疾病病變組織內的成分譜、濃度變化、作用位點或受體、有效成分與組織的相互作用及量效關系，以闡明方劑作用的物質基礎及機制，尋找中藥歸經理論的客觀證據；同時藥物療效與不良反應在某種程度上與機體組織器官中的藥量有關：即血藥濃度、組織濃度與效應相關。目前循證醫學的證據認為，預防性使用抗生素能顯著降低急性壞死性胰腺炎患者的胰腺壞死組織感染和膿毒血癥的發生率和病死率[7]，大承氣湯治療急性胰腺炎時有保持血管內皮光滑、調節胰腺微循環、保護胰腺細胞、改善胰腺組織病理變化等作用[8]，而這可能是中藥歸經理論和臨床療效的基礎。

5 大承氣湯治療急性胰腺炎的方劑組織代謝藥理學模型研究

重癥急性胰腺炎具有“痞、滿、燥、實”的特點，屬于典型“陽明腑實證”，大承氣湯治療急性胰腺炎的通里攻下方法已經在全國范圍內取得共識，臨床療效確切[9]；但其物質基礎和作用靶點不清楚。在方劑組織代謝藥理學新假說的指導下探索方劑各成分穿透血胰屏障到達胰腺組織內的成分譜和濃度，研究急性胰腺炎模型胰源性物質代謝的變化，其中某些顯著變化可能正是方劑藥效物質的作用靶點。組織代謝藥理學反映整體的物質圖譜，可直接認識急性胰腺炎中機體或胰腺的病理生理和生化狀態，探索大承氣湯的作用靶點，闡明“陽明腑實證”的本質。 應用組織代謝藥理學方法，采用LC-MS-MS技術測定給藥模型犬血清和胰腺組織中的方劑有效成分和多種胰源性代謝物質(如淀粉酶、脂肪酶、胰島素、胰高血糖素、膽囊收縮素、胃泌素、胃動素等)的動態變化，從物質成分和量的經時變化來探索大承氣湯治療急性胰腺炎的生物標記物，從藥物整體作用所產生的生物化學物質(酶、神經遞質、內分泌激素)來尋找其治療的物質基礎；同時，聯合方劑藥動學來研究方劑組織內物質濃度與生物效應的關系，能更真實地反映方劑中多種成分的綜合療效與體內動態過程，符合整體觀原則；用組織代謝藥理學的方法研究“陽明腑實證”的本質，探索方劑對“證”的療效基礎和作用靶點。

6 結語

在方劑組織代謝藥理學的指導下，通過對體液和胰腺組織中物質代謝及量變化的分析，同時觀測大承氣湯引起的所有生化變化，獲得方劑治療前后“組織內藥效物質指紋圖譜”，以探索方劑治療的證候靶點，同時評價方劑產生的一系列組織內代謝過程和作用機制、胰腺靶器官的效應、組織損傷及修復機制等，將組織內物物質濃度的變化及其分子基礎與將來的表型結局聯系起來；結合方劑組織代謝藥理學新方法，更深刻地揭示方劑整體性調節人體功能網絡的機制和作用靶點。