作者：郭云韜; 喻超; 陳禮聞; 孫誠(chéng)誼 刊期：2017年第02期

目的：探討siRNA干擾對(duì)人肝癌HCCLM3細(xì)胞細(xì)胞分裂相關(guān)基因NUF2蛋白表達(dá)及細(xì)胞遷移與侵襲能力的影響。方法：轉(zhuǎn)染siRNA到HCCLM3細(xì)胞,采用western blot法檢測(cè)HCCLM3細(xì)胞的NUF2蛋白表達(dá);應(yīng)用劃痕、Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA后,肝癌HCCLM3細(xì)胞體外遷移和侵襲能力。結(jié)果：siRNA轉(zhuǎn)染組HCCLM3細(xì)胞NUF2蛋白的表達(dá)明顯低于對(duì)照組,HCCLM3細(xì)胞遷...

作者：郭云韜; 喻超; 孫誠(chéng)誼 刊期：2017年第02期

目的：探討KIF20A在肝癌細(xì)胞系、肝癌組織及癌旁組織中的表達(dá),并分析其臨床意義。方法：采用RT-PCR和western blot檢測(cè)正常永生化肝細(xì)胞LO2和肝癌細(xì)胞QGY7701、HCC9810、QGY7703、Hep G2、SMMC7721、Huh7及Hep3B細(xì)胞內(nèi)KIF2OA mRNA和蛋白的表達(dá)水平,同時(shí)檢測(cè)KIF20A mRNA和蛋白在5對(duì)肝癌組織及相應(yīng)癌旁組織的表達(dá)情況;通過(guò)癌癥基因組圖譜（TCGA）...

作者：劉姿麟; 林慕之; 況春燕; 劉興德 刊期：2017年第02期

目的：構(gòu)建大鼠睡眠因子1（Slfn1）基因的發(fā)夾狀RNA質(zhì)粒,并進(jìn)行腺病毒載體包裝。方法：根據(jù)Rat slfn1基因的轉(zhuǎn)錄本設(shè)計(jì)并合成3個(gè)干擾RNA靶點(diǎn)ShRNA-Slfn1（1）、ShRNA-Slfn1（2）及ShRNA-Slfn1（3）,并將單鏈的引物退火成雙鏈oligo序列,連接入雙酶切線性化的RNA干擾載體（p DKD-CMV-U6-shRNA）的U6啟動(dòng)子下游,替換掉原來(lái)的ccd B基因;利用Admax系...

作者：況春燕; 楊藩 刊期：2017年第02期

目的：大鼠Ad-pDOV-mCMV-TRPC4-EGFP-3FLAG基因重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其基因結(jié)構(gòu)分析。方法：通過(guò)UCSC（http：//genome.ucsc.Edu/）分析大鼠瞬時(shí)受體電位通道4（TRPC4）及其家族基因組結(jié)構(gòu),并通過(guò)NCBI確定了TRPC4的蛋白結(jié)構(gòu)域,通過(guò)Bio GPS（http：//biogps.org/#goto=welcome）分析其表達(dá)模式;PCR擴(kuò)增大鼠TRPC4蛋白編碼區(qū)域（CDS）,并通過(guò)限制性...

作者：劉姿麟; 林慕之; 況春燕; 劉興德 刊期：2017年第02期

目的：建立一種可行的原代血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）培養(yǎng)方法。方法：嚴(yán)格無(wú)菌操作環(huán)境下取大鼠胸主動(dòng)脈及腹主動(dòng)脈中層組織,通過(guò)組織塊貼壁法進(jìn)行原代培養(yǎng),胰酶消化法進(jìn)行傳代,應(yīng)用倒置相差顯微鏡對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,使用免疫熒光法對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果：原代培養(yǎng)第4~6天時(shí),組織塊周圍開(kāi)始有長(zhǎng)梭形細(xì)胞爬出;第7~9天時(shí),細(xì)胞...