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大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)與鑒定

劉姿麟; 林慕之; 況春燕; 劉興德 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院; 貴州貴陽550002; 貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科; 貴州貴陽550002; 貴州醫(yī)科大學(xué); 貴州貴陽550004

摘要：目的：建立一種可行的原代血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）培養(yǎng)方法。方法：嚴(yán)格無菌操作環(huán)境下取大鼠胸主動(dòng)脈及腹主動(dòng)脈中層組織,通過組織塊貼壁法進(jìn)行原代培養(yǎng),胰酶消化法進(jìn)行傳代,應(yīng)用倒置相差顯微鏡對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,使用免疫熒光法對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果：原代培養(yǎng)第4~6天時(shí),組織塊周圍開始有長(zhǎng)梭形細(xì)胞爬出;第7~9天時(shí),細(xì)胞爬出較少的呈網(wǎng)狀生長(zhǎng),組織塊周圍細(xì)胞爬出較多的呈漩渦狀生長(zhǎng),致密排列呈束狀;第10~14天時(shí),細(xì)胞呈典型的＂峰—谷＂樣結(jié)構(gòu),相互融合達(dá)80%,此時(shí)傳代細(xì)胞生長(zhǎng)速度增快,細(xì)胞變大,折光性減弱,免疫熒光染色鑒定可見VSMC特異性的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SM-actin）表達(dá),表達(dá)的陽性細(xì)胞在95%以上。結(jié)論：成功建立一種可行的原代VSMC培養(yǎng)方法。

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