大鼠主動脈血管平滑肌細胞原代培養與鑒定
摘要:目的:建立一種可行的原代血管平滑肌細胞(VSMC)培養方法。方法:嚴格無菌操作環境下取大鼠胸主動脈及腹主動脈中層組織,通過組織塊貼壁法進行原代培養,胰酶消化法進行傳代,應用倒置相差顯微鏡對不同培養時間的細胞進行形態學觀察,使用免疫熒光法對培養細胞進行鑒定。結果:原代培養第4~6天時,組織塊周圍開始有長梭形細胞爬出;第7~9天時,細胞爬出較少的呈網狀生長,組織塊周圍細胞爬出較多的呈漩渦狀生長,致密排列呈束狀;第10~14天時,細胞呈典型的"峰—谷"樣結構,相互融合達80%,此時傳代細胞生長速度增快,細胞變大,折光性減弱,免疫熒光染色鑒定可見VSMC特異性的α-平滑肌肌動蛋白(α-SM-actin)表達,表達的陽性細胞在95%以上。結論:成功建立一種可行的原代VSMC培養方法。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系貴陽醫學院學報雜志社