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非洲豬瘟病毒K205R蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

趙亞茹; 韓蓉; 楊吉飛; 牛慶麗; 關貴全; 羅建勛; 劉光遠; 殷宏; GRZEGORZ; Wozniakowski; 劉志杰 中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室甘肅省動物寄生蟲病重點實驗室; 甘肅蘭州730046; Department; of; Swine; Diseases; National; Veterinary; Research; Institute; 24-100; Pulawy; Poland; 江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心; 江蘇揚州225009

摘要：將合成的非洲豬瘟病毒K205R基因序列插入pET-28a(+)表達載體,經(jīng)IPTG誘導表達pET-28a-K205R重組蛋白。用制備的重組抗原免疫BALB/c小鼠,采用化學融合方法融合、篩選,獲得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的雜交瘤細胞株。經(jīng)鑒定,這3株單克隆抗體(單抗)的亞類均為IgG1型;單抗的腹水效價分別為1∶51200、1∶409600和1∶102400。將這3株雜交瘤細胞連續(xù)培養(yǎng)20代,在第20代仍有很高的分泌抗體的能力,表明其穩(wěn)定性較好。Western-blot檢測結果表明,這3株單抗與K205R重組蛋白有良好的反應性和特異性。上述結果表明,本研究制備的這3株雜交瘤細胞株能夠穩(wěn)定分泌抗體,分泌的抗體特異性高,為非洲豬瘟診斷技術的研究奠定了基礎。

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