口蹄疫病毒非結構蛋白抗體時間分辨熒光免疫分析檢測方法的建立
摘要：為建立快速定量檢測羊血清中口蹄疫病毒非結構蛋白抗體的方法,本研究通過優化抗原表達條件等步驟,在大腸桿菌原核表達系統中獲得了可溶性的3A-3B1-3B2融合蛋白,基于純化的可溶性融合蛋白建立了口蹄疫病毒非結構蛋白抗體時間分辨熒光免疫分析檢測試劑盒。該方法能夠檢測羊血清中的口蹄疫病毒非結構蛋白抗體,敏感性高,特異性強,對其他相關的羊類病原無交叉反應,其組內與組間變異系數分別低于10%和15%,具有良好的重復性。對300份臨床血清樣品進行檢測,同Procheck公司的口蹄疫非結構蛋白抗體試劑盒進行比較,陽性樣品符合率為98%,陰性樣品符合率為92%,總符合率為95%。重復性試驗組內與組間變異系數均小于10%。口蹄疫病毒非結構蛋白抗體時間分辨熒光免疫分析檢測方法同傳統的ELISA方法相比,特異性相當、敏感性更高,操作簡單、快速,具有較高的應用推廣價值。
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