午夜亚洲国产日本电影一区二区三区,九九久久99综合一区二区,国产一级毛片视频,草莓视频在线观看精品最新

加急見刊

甲基結合蛋白1對小鼠胚胎干細胞增殖及克隆形態的影響

張鵬; 楊紅蘭; 劉含; 周艷華; 楊燕; 范安然; 何志旭; 舒莉萍 貴州醫科大學細胞工程生物醫藥技術國家地方聯合工程實驗室; 組織工程與干細胞實驗中心; 貴州省再生醫學重點實驗室; 貴州貴陽550004; 中國醫學科學院成體干細胞轉化研究重點實驗室; 貴州貴陽550004; 遵義醫科大學附屬醫院兒科學教研室; 貴州遵義563000

摘要：目的:研究甲基結合蛋白1(Mbd1)對小鼠胚胎干細胞克隆形態及增殖的影響。方法:設計針對Mbd1轉錄起始位點的gRNA,將表達有gRNA和Cas9蛋白的質粒使用脂質體轉染方法轉入小鼠胚胎干細胞(J1);使用抗生素將未轉染成功的細胞殺死后,細胞繼續培養7d,挑取單克隆細胞,采用PCR法篩選敲除Mbd1的純合子細胞,觀察Mbd1缺失對小鼠胚胎干細胞克隆形態的影響;使用細胞計數法檢驗Mbd1對胚胎干細胞增殖的影響。結果:通過Cripsr/Cas9成功獲得敲除Mbd1的胚胎干細胞,Mbd1缺失后的小鼠胚胎干細胞喪失了常規小鼠胚胎干細胞的3D克隆形態,細胞呈現單層扁平克隆;Mbd1缺失后小鼠胚胎干細胞增殖速率變慢。結論:Mbd1通過影響小鼠胚胎干細胞克隆形態和增殖而影響胚胎干細胞的多能性。

注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系貴州醫科大學學報雜志社