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Tau蛋白通過外泌體傳遞到細(xì)胞外空間的研究

張鵬; 舒莉萍; 周艷華; 范安然 貴州醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞工程生物醫(yī)藥技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室; 組織工程與干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中心; 貴州省再生醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 貴州貴陽550004; 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院成體干細(xì)胞轉(zhuǎn)化研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 貴州貴陽550004

摘要:目的:驗(yàn)證HEK293-Tau細(xì)胞的外泌體中是否存在Tau蛋白、及Tau蛋白是否能夠在細(xì)胞間通過外泌體傳播。方法:通過經(jīng)典的超速離心結(jié)合超濾法分離HEK293-Tau細(xì)胞的外泌體,通過透射電鏡分析外泌體形態(tài)、采用Western blot鑒定外泌體特異性標(biāo)記物(HSP70、CD63及CD9)及外泌體和細(xì)胞培養(yǎng)液中Tau蛋白表達(dá)。結(jié)果:超速離心結(jié)合超濾法成功地分離了HEK293-Tau細(xì)胞的外泌體,在透射電鏡下觀察到外泌體呈現(xiàn)典型的杯狀形態(tài),分離的外泌體中檢測到HSP70、CD63及CD9等外泌體特異性標(biāo)記物的表達(dá);在外泌體及細(xì)胞培養(yǎng)液中能夠檢測到Tau蛋白的存在。結(jié)論: HEK293-Tau 細(xì)胞外泌體中存在Tau蛋白,并且Tau蛋白可以通過外泌體傳遞到細(xì)胞外空間。

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