Alexa Fluor 488 NHS Ester染料提高流式細胞周期檢測結果的可行性
摘要：目的:探討Alexa Fluor 488 NHS Ester染料用于提高流式細胞周期檢測結果的可行性。方法:以293細胞作為研究對象,采用兩種方案進行細胞周期檢測,每種方案設4組;方案一,按照細胞周期檢測試劑盒的說明書對4組細胞進行染色;方案二,先對4組細胞用0.0、0.4、2.0及10.0 mg/L的Alexa Fluor 488 NH S Ester染料染色15 min,然后將4組細胞混合在一支試管中再用碘化丙啶(PI)進行染色;將兩種染色方案獲得的細胞上流式細胞儀檢測,分析比較兩種方案的4組細胞檢測結果。結果:方案一染色的4組細胞,流式細胞儀檢測結果不盡一致,個別組間由于細胞密度不同導致染色結果存在差異;方案二經不同濃度Alexa Fluor 488 NHS Ester染色的4組細胞雖然混合于一支試管,檢測結果經Flowjo X軟件分析時能明顯分出4群細胞,對4群細胞分別進行細胞周期分析比較,結果一致。結論:采用不同濃度Alexa Fluor 488 NHS Ester染料預染細胞后混合在一起進行PI染色能夠提高細胞周期檢測結果的可信度,在神經退行性疾病研究中可節約病人的取樣次數及數量。
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