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茶樹miR164a及其靶基因的鑒定與表達分析

孔雷; 朱向向; 王屹瑋; 謝小芳; 江昌俊; 李葉云 安徽農業大學茶樹生物學與資源利用國家重點實驗室; 安徽合肥230036

摘要:植物miR164通過負調控靶基因NAC轉錄因子(NAC transcription factors)參與植物生長發育調控和逆境脅迫等復雜的生理過程。利用茶樹microRNA高通量測序和降解組測序,對茶樹miR164a及其靶基因NAC1進行了克隆、序列分析與鑒定,并對其在葉片發育、高溫和低溫脅迫中表達模式進行了研究。茶樹miR164a前體序列長度為126bp,成熟序列21bp。CsNAC1ORF框長度912bp,編碼303個氨基酸,在CsNAC1蛋白的N端有典型NAM結構域,C端有Csn-miR164a識別位點。RLM-5′RACE驗證CsNAC1為茶樹miR164a的靶基因。熒光定量表達分析表明,Csn-miR164a在芽中表達量最高,第7葉中最低。在高溫和低溫脅迫下,Csn-miR164a都下調表達,而CsNAC1表達水平上升,CsNAC1與Csn-miR164a呈現負相關。研究表明茶樹miR164a及其靶基因CsNAC1可能與茶樹生長及抗逆相關。

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