茶樹Na^+/H^+逆向轉運蛋白基因CsNHX1、CsNHX2的克隆及表達分析
摘要:Na+/H+逆向轉運蛋白(Na^+/H^+antiporter,NHX)在植物生長發育與逆境響應過程中扮演著重要角色。本研究以龍井長葉茶樹品種為材料,克隆獲得了茶樹CsNHX1和CsNHX2基因cDNA全長序列,GeneBank登錄號分別為:MG722977和MG515211。生物信息學分析結果顯示,CsNHX1和CsNHX2的cDNA全長分別為1 691 bp和1 757 bp,均包含1個1 626 bp的開放閱讀框,編碼541個氨基酸,預測分子量為59.5 kD和59.7 kD,理論等電點為7.07和8.79;蛋白序列分析結果顯示,CsNHX1和CsNHX2屬于典型的跨膜蛋白,均含有保守的Na^+/H^+Exchanger結構域;進化樹分析顯示,CsNHX1和CsNHX2均為IC類中定位于液泡膜上的Class I成員。qRT-PCR結果顯示,干旱、低溫和鹽脅迫能夠顯著誘導CsNHX1和CsNHX2上調表達;外源ABA處理下,CsNHX1和CsNHX2表達水平整體變化趨勢不顯著;高溫脅迫處理下,茶樹CsNHX1表達水平顯著降低,而CsNHX2表達水平逐漸增加,表明茶樹CsNHX1和CsNHX2參與了茶樹對多種環境脅迫的響應過程,但對于不同逆境脅迫的應答模式存在一定差異。
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