滇牡丹類黃酮7-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的鑒定與表達(dá)分析
摘要:以野生滇牡丹為試驗(yàn)材料,以其轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),采用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)克隆得到一個(gè)具完整開放閱讀框的類黃酮7-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因(Pd7GT),并通過(guò)生物信息學(xué)分析手段、基因表達(dá)對(duì)該基因進(jìn)行分析。結(jié)果顯示:該基因全長(zhǎng)1 446bp(GenBank登錄號(hào)為KX394687),可編碼481個(gè)蛋白氨基酸;生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)Pd7GT蛋白C末端含有典型糖基轉(zhuǎn)移酶識(shí)別區(qū)(WAPQV)和UDP-葡萄糖基配體綁定位點(diǎn)(HCGWNS)的PSPG盒子,其蛋白序列GWAPQVMILEHEAVGGFVTHCGWNSTLEGISAGLPLVTWPIFAEQFYNEK,與可可(XP_007042481)、Herrannia umbratica(XP_021298085)、毛果楊(XP_006379195)、巨桉(XP_010066837)等以葡萄糖為糖基配體的類黃酮7-O-糖基轉(zhuǎn)移酶聚為一類;Pd7GT基因在組織莖中表達(dá)量最高、不同花發(fā)育時(shí)期的花謝期表達(dá)量最高、不同顏色花瓣中黃花花瓣表達(dá)量最高。本研究為滇牡丹糖基轉(zhuǎn)移酶異源表達(dá)、分子育種等研究提供一定的基礎(chǔ),為未來(lái)通過(guò)基因工程培育具新穎花色和抗性的滇牡丹新品種提供必要材料。
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