人LRG1基因的原核表達及生物信息學分析
摘要：為了探討LRG1基因結構與功能,對該基因進行克隆并構建到原核表達載體上,并對其進行表達及生物信息學分析。用Trizol法提取人肝癌HepG2細胞總RNA后,PCR擴增得到LRG1片段,經鑒定后將目的基因與原核表達載體pET28a連接,經誘導表達獲得His-LRG1蛋白。LRG1基因cDN段大小為1 044 bp,編碼347個氨基酸;成功構建pET28a原核表達載體,經多次不同條件誘導后,得到大小約40 kD目的蛋白;利用軟件對LRG1蛋白的一級、二級結構進行了預測,分析總結得LRG1基因編碼的蛋白是一個不穩定且具有親水性的蛋白,可與多種信號開關相互作用。LRG1屬于高度保守的富亮氨酸重復家族成員,其原核表達載體不易誘導產生大量目的蛋白,克隆表達該基因有利于驗證其結構與功能關系。
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