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人LRG1基因的原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析

陳旗; 胡偉杰; 騰橋; 夏麗潔 新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院; 生物資源基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 烏魯木齊830046

摘要：為了探討LRG1基因結(jié)構(gòu)與功能,對(duì)該基因進(jìn)行克隆并構(gòu)建到原核表達(dá)載體上,并對(duì)其進(jìn)行表達(dá)及生物信息學(xué)分析。用Trizol法提取人肝癌HepG2細(xì)胞總RNA后,PCR擴(kuò)增得到LRG1片段,經(jīng)鑒定后將目的基因與原核表達(dá)載體pET28a連接,經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)獲得His-LRG1蛋白。LRG1基因cDN段大小為1 044 bp,編碼347個(gè)氨基酸;成功構(gòu)建pET28a原核表達(dá)載體,經(jīng)多次不同條件誘導(dǎo)后,得到大小約40 kD目的蛋白;利用軟件對(duì)LRG1蛋白的一級(jí)、二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了預(yù)測(cè),分析總結(jié)得LRG1基因編碼的蛋白是一個(gè)不穩(wěn)定且具有親水性的蛋白,可與多種信號(hào)開關(guān)相互作用。LRG1屬于高度保守的富亮氨酸重復(fù)家族成員,其原核表達(dá)載體不易誘導(dǎo)產(chǎn)生大量目的蛋白,克隆表達(dá)該基因有利于驗(yàn)證其結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系。

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