綿羊皮膚成纖維細胞對G418及Blasticidin S抗性的研究
摘要：抗生素常被用于對轉基因動物、植物及微生物細胞進行篩選。在進行抗生素抗性篩選前,需要摸索合適的抗生素使用濃度,其原因在于:過低的篩選濃度無法抑制非轉基因細胞的生長;反之,過高的篩選濃度會導致轉基因細胞死亡。為了摸索綿羊皮膚成纖維細胞(sheep skin fibroblasts,SSFs)對G418及Blasticidin S的抗性,本實驗以體外培養的SSFs為實驗材料,采用不同濃度的上述兩種抗生素處理SSFs,采用活細胞計數的方式檢測SSFs對上述兩種抗生素的抗性。單獨使用G418或Blasticidin S導致SSFs全部死亡的最低致死濃度分別為200μg/mL及4μg/mL;當兩種抗生素聯合使用時,其最低致死濃度為100μg/mL G418+3μg/mL Blasticidin S或150μg/mL G418+2μg/mL Blasticidin S。該實驗為采用這兩種抗生素篩選轉基因SSFs提供了理論基礎。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系基因組學與應用生物學雜志社
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