金線蘭根莖葉內(nèi)參基因的篩選
摘要:為了篩選金線蘭根莖葉最合適的內(nèi)參基因,本研究使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),以不同發(fā)育階段的金線蘭的根、莖、葉為材料,使用GeNorm、NormFinder和RefFinder軟件分析5個(gè)備選基因(26SrRNA,ACT-1, ACT-2, UBQ, EF-1α)的穩(wěn)定性和差異表達(dá)情況,篩選合適的內(nèi)參基因。結(jié)果顯示,不同營(yíng)養(yǎng)器官和生長(zhǎng)時(shí)期的內(nèi)參基因表達(dá)穩(wěn)定性有一定差別:(1)在營(yíng)養(yǎng)器官組織中,葉的最合適內(nèi)參基因?yàn)镋F-1α,根的為UBQ與EF-1α,莖的為ACT-1;(2)在不同生長(zhǎng)發(fā)育階段中,2個(gè)月樣品的最合適內(nèi)參基因?yàn)?6SrRNA,4個(gè)月為UBQ與EF-1α。綜合以上結(jié)果表明在分析金線蘭基因差異表達(dá)時(shí),適合的內(nèi)參基因是EF-1α,內(nèi)參基因組合則可選擇EF-1α與26SrRNA。本研究為金線蘭后續(xù)相關(guān)研究提供參考。
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