作者：王悅云， 徐文芬， 何順志

【摘要】 目的通過測定貴州產淫羊藿藥材不同種類、不同藥用部位中多糖的含量，為合理開發利用貴州淫羊藿資源提供理論依據。方法采用硫酸－苯酚法，對貴州產10種淫羊藿藥材不同藥用部位中的多糖含量進行測定。結果10種貴州產淫羊藿藥材因種類、產地、藥用部位不同，其多糖含量存在差異，根和葉中多糖含量差異較小，根和葉中的多糖含量均大于葉柄和莖的。結論為保證貴州淫羊藿資源的可持續利用，淫羊藿藥材入藥以地上部分（去粗梗）更為合理。

【關鍵詞】 貴州產； 淫羊藿； 藥用部位； 多糖； 苯酚硫酸法

Abstract：ObjectiveTo provide a basis for development of Epimedium herbs resources in Guizhou，the contents of polysaccharide of Epimedium herb samples of different species，different medicinal parts were determined. MethodsDifferent medicinal parts of 10 species in Guizhou were determined by phenol-sulfuric acid method. ResultsThe content of polysaccharide was influenced by different species， different origins and different medicinal parts，and the polysaccharide content of leaf was higher than that of stem and petiole was similar to the content of root. ConclusionIt is right to collect the leaf and stem parts of the herbs which provide a reliable basis for conservation and reasonable development of Epimedium herbs resources in Guizhou.

Key words：Guizhou； Epimedium herbs； Different medicinal parts； Polysaccharide； Phenol-sulfuric acid method 淫羊藿來源于小檗科淫羊藿屬Epimedium L.植物，是使用悠久的傳統中藥之一，也是貴州重要的道地藥材，具有補腎陽、強筋骨、助陽益精等功效，主治陽痿遺精、筋骨痿軟、風濕痹痛、麻木拘攣等癥。據文獻報道，淫羊藿多糖具有明顯的免疫活性，是一種很有發展前途的生物調節劑［1］。現代臨床上常用于治療骨質疏松、更年期綜合征、乳房腫塊、高血壓病、冠心病，具抗腫瘤、抗衰老等功效，受到國內外廣泛關注。目前貴州產淫羊藿多達15種以上［2，3］，其中，巫山淫羊藿E. wushanense，為《中國藥典》收載品種；粗毛淫羊藿E. acuminatum，天平山淫羊藿E. myrianthum，黔嶺淫羊藿E.leptorrhizum，氈毛淫羊藿E.coactum為《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》收載品種［4，5］。淫羊藿藥材是相關醫藥工業生產重要的原料藥材，本實驗采用苯酚－硫酸法對貴州產不同種類淫羊藿藥材不同藥用部位中多糖的含量進行測定［6，7］，旨在為合理開發利用貴州淫羊藿資源，中藥材淫羊藿GAP基地建設及其相關醫藥工業生產提供理論依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器 上海第三分析儀器廠723型分光光度計；瑞士Mettler-Toledo AG135型電子天平。

1.2 藥材 10種淫羊藿藥材實驗樣品采自貴州省余慶、貴陽烏當、龍里、雷山、劍河、江口、萬山、務川等地（花期至果期采集，陰干或曬干），經何順志研究員鑒定為：黔嶺淫羊藿E.leptorrhizum，粗毛淫羊藿E. acuminatum，天平山淫羊藿E. myrianthum，巫山淫羊藿E.wushanense，劍河淫羊藿E.jianheense（暫定），萬山淫羊藿E.wanshanense（暫定），時珍淫羊藿E.lishihchenii，四川淫羊藿E. sutchuenense. 長蕊淫羊藿E.dolichostemon，氈毛淫羊藿E.coactum，憑證標本存于貴州中藥研究所標本室（HGCM）。

1.3 對照品及試劑 無水葡萄糖、濃硫酸、苯酚均為分析純。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備 精密稱取經105℃干燥至恒重的無水葡萄糖60.0 mg，置于100 ml量瓶中，加水溶解至刻度，搖勻，即得。

2.2 標準曲線的制備 精密量取對照品溶液（0.606 mg·ml-1）0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0 ml，分別置50 ml量瓶中，各加水至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液2 ml，置具塞試管中，各加4%苯酚溶液1 ml，混勻，迅速加入硫酸7.0 ml，搖勻，置40℃水浴中保溫30 min，取出后置冰水浴中放置5 min，取出，以相應試劑為空白。以紫外-可見分光光度法于490 nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，進行回歸計算，得到淫羊藿多糖的回歸方程和相關系數為：Y=0.050 9X - 0.022，r=0.999 5，結果表明淫羊藿多糖在1.212～9.696 μg·ml-1范圍內與吸光度的線性關系良好。

2.3 供試品溶液的制備 取樣品粉末約0.5 g（藥材陰干或曬干后，粉碎過40目篩），精密稱定，置錐形瓶中，精密加水50 ml，稱定重量，靜置1 h，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液2 ml，置100 ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2 ml，置具塞試管中，以“2.2”項下自“各加4%苯酚溶液1 ml”起，依法制備測定(同時采用烘干法測定藥材水分)。

2.4 精密度實驗 精密吸取對照品溶液2 ml，按標準曲線制備方法制備標準品供試品和空白對照液，在490 nm的波長處測定吸光度，重復測定5次，得RSD為0.21%，表明精密度良好。

2.5 重復性實驗 精密稱取同一樣品6份，按供試品溶液的制備方法制備，分別測定其吸光度，結果多糖含量RSD為0.23%，表明本法重復性良好。

2.6 穩定性實驗 精密稱取同一樣品，按供試品溶液的制備方法制備，分別于0，10，20，30，40，50，60 min測定其吸光度，測得多糖含量RSD為2.01%，表明供試品顯色在1 h內基本穩定。

2.7 回收率實驗 精密稱取已知多糖含量的樣品6份，每份約0.2 g，分別精密加入葡萄糖對照品溶液（4.02 mg·ml-1）各5 ml，按供試品溶液的制備方法制備，分別測定其吸光度，6次平均回收率為97.64%，RSD為1.46%。結果見表1。

表1 樣品中淫羊藿多糖回收率實驗結果 （略）

2.8 樣品含量測定 將采集的10種淫羊藿藥材樣品按不同藥用部位分別制備供試品溶液，依法進行測定。結果見表2。

表2 10種貴州產淫羊藿藥材不同藥用部位中多糖的含量（略）

3 討論 由表2可知，貴州產的10種淫羊藿藥材因種類、產地及藥用部位的不同，其淫羊藿多糖的含量存在差異，根和葉中多糖含量差異較小，根和葉中的多糖含量均大于葉柄和莖的，其中貴州龍里和萬山產的粗毛淫羊藿和萬山淫羊藿葉中多糖含量較高。 本實驗參照文獻［4］進行了加熱回流提取和超聲提取對比，結果為前者提取淫羊藿中多糖含量較高，故仍然選用文獻的加熱回流提取方法。 通過對貴州產10種淫羊藿藥材質量進行研究，為貴州淫羊藿資源的可持續發展、淫羊藿GAP基地建設及其相關醫藥工業生產提供了理論依據。

【