作者：石延榜， 張振凌， 許丹妮

【摘要】 目的檢測河南不同產(chǎn)地山茱萸藥材質(zhì)量。方法《中國藥典》法測定山茱萸藥材的水浸出物、醇浸出物、水分測定、灰分測定，高效液相法測定馬錢素和莫若苷的含量。結(jié)果不同產(chǎn)地山茱萸藥材的水分、酸不溶性灰分部分樣品高于《中國藥典》規(guī)定；水浸出物、醇浸出物、灰分和馬錢素含量均達到《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論 不同產(chǎn)地山茱萸藥材的質(zhì)量不同，所購河南市售樣品除水分、灰分外，基本符合《中國藥典》規(guī)定。

【關(guān)鍵詞】 山茱萸 質(zhì)量 高效液相

山茱萸作為我國傳統(tǒng)珍稀藥材和臨床常用名貴中藥，應(yīng)用越來越廣，種植山茱萸的藥材基地也越來越多，導(dǎo)致市場上山茱萸的質(zhì)量參差不齊，所以對山茱萸藥材的質(zhì)量控制就顯得越來越重要。山茱萸主產(chǎn)于河南西峽、浙江臨安、淳安、安徽、陜西漢中等地。以河南西峽產(chǎn)量最大，質(zhì)量最好，為道地藥材。本實驗對河南省內(nèi)各個不同產(chǎn)地的山茱萸藥材進行質(zhì)量檢測。現(xiàn)報道如下。

1 器材

1.1 儀器BS210S型電子天平；FW-100高速萬能粉碎機；GS101-2D電熱恒溫鼓風(fēng)干燥器；振蕩器； SXZ-4-10型馬福爐；KQ-500DV 型數(shù)控超聲清洗器干燥器。

1.2 試劑乙醇、醋酸乙酯、甲酸、甲苯、無水乙醇為分析純；乙腈、甲醇為色譜級；娃哈哈純凈水；熊果酸、莫諾苷、馬錢素對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供。

1.3 藥材山茱萸藥材購自河南不同產(chǎn)區(qū)，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis sieb.et Zucc.

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層鑒別取本品粉末0.5 g，加乙酸乙酯10 ml，超聲處理15 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇2 ml使溶解，作為供試品溶液。另取熊果酸對照品，加無水乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］試驗，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；置紫外光燈（365 nm）下檢視，顯相同的橙黃色熒光斑點。

2.2 水分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量測定［1］結(jié)果見表1。 表1 山茱萸藥材水分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量測定結(jié)果（略）

2.3 馬錢苷與莫諾苷含量測定

2.3.1 色譜條件ODS-C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×250 mm大連依利特分析儀器有限公司），乙睛水（15∶85）為流動相，檢測波長240 nm，流速1 ml·min-1，柱溫25℃ 。

2.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取馬錢素對照品0.88 mg和莫諾苷對照品1.22 mg置10 ml容量瓶中，加80%甲醇，溶解，定容，0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備［2］取山茱萸生品及酒制品（常壓、加壓）的粉末（過3號篩）各約0.1 g，精密稱定，加80%甲醇25 ml，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，用80%甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，0.45 μm微孔濾膜，即得。

2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取對照品溶液1， 3， 5， 7 ，9μl ，分別注入高效液相色譜儀中，按上述色譜條件測定。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，對照品含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計算馬錢素和莫諾苷的回歸方程分別為Y=743 157X-40 535，r=0.999 6，Y=950 012X-45 581。r=0.999 6：。結(jié)果表明馬錢素在0.088～0.792 μ圍內(nèi)線性良好，莫諾苷在0.122～1.098 μg范圍內(nèi)線性良好。

2.3.5 穩(wěn)定性實驗分別在0，2，4，6，8，12 h手動進馬錢素對照品溶液5 μl，照前述色譜條件測定峰面積積分值計算馬錢素和莫諾苷RSD值分別為RSD=2.65％，RSD=1.62%。結(jié)果表明馬錢素和莫諾苷在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，。

2.3.6 精密度實驗連續(xù)手動進樣馬錢素對照品5 μl，按前述條件測定峰面積積分值，計算馬錢素和莫諾苷RSD值分別為RSD=2.01％，RSD=1.33%，結(jié)果表明精密度良好。

2.3.7 重復(fù)性實驗稱取山茱萸同一樣品粗粉5份各約0.1 g，精密稱定，按照上述供試品溶液制備方法和色譜條件，制備供試品溶液并注入高效液相色譜儀，測定峰面積積分值，計算馬錢素和莫諾苷RSD值分別為RSD=1.01％，RSD=1.89%，結(jié)果表明重現(xiàn)性良好。

2.3.8 加樣回收率實驗取5種已知馬錢素含量的山茱萸粉末約0.05 g各1份，精密稱定，按0.05 g山茱萸粉末所含馬錢素及莫諾苷的量精密加入馬錢素和莫諾苷對照品，按供試品溶液制備項下操作，得到5份加樣回收供試液。自動進樣各加樣回收供試液10 μl，注入液相色譜儀，測定，用外標(biāo)法根據(jù)峰面積積分值進行計算，結(jié)果馬錢素平均加樣回收率99.08 ％，RSD=2.04％；莫諾苷加樣回收率100.17%，RSD=1.28%。

2.3.9 含量測定取各供試品溶液分別手動進樣10μl，測定馬錢素和莫諾苷峰面積值，計算樣品含量。結(jié)果見表2。表2 市售不同產(chǎn)地山茱萸藥材馬錢素、莫諾苷含量數(shù)據(jù)（略）

2005版《中國藥典》規(guī)定山茱萸按干燥品計算，含馬錢苷不得少于0.60%。從測出的數(shù)據(jù)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的山茱萸馬錢素含量有差異，平均在0.76%～1.48%之間變化，大部分合格。其中以河南鞏義產(chǎn)的山茱萸含量最高為1.48%，河南郟縣產(chǎn)的山茱萸含量最低為0.76%。2005版《中國藥典》沒有規(guī)定山茱萸莫諾苷的含量。但從測出的數(shù)據(jù)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的山茱萸莫諾苷含量有差異，平均在1.05%～1.83%之間變化，均高于馬錢素的含量。

3 討論

理化鑒別在薄層色譜中，9份樣品與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；置紫外光燈（365 nm）下檢視，顯相同的橙黃色熒光斑點且10個點均在同一直線上。說明不同產(chǎn)地山茱萸均含有熊果酸 。

水分和灰分檢查結(jié)果證明9份不同產(chǎn)地山茱萸藥材水分含量大部分不符合《中國藥典》規(guī)定，只有嵩縣、白云山、實驗室陳品的山茱萸水分含量合格。總灰分檢測結(jié)果均為合格，說明沒有其他無機物污染和摻雜。酸不溶性灰分檢測結(jié)果大部分合格，郟縣和嵩縣產(chǎn)的山茱萸超過《中國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。

不同產(chǎn)地的山茱萸中馬錢素含量有差異，但均符合《中國藥典》要求。不同產(chǎn)地的山茱萸中莫諾苷含量有差異，平均在0.886%～1.0875%之間變化，其中以河南南陽產(chǎn)的山茱萸含量最高為1.14%，以河南郟縣產(chǎn)的山茱萸含量最低為0.64%。藥典沒有作具體規(guī)定，但實驗表明山茱萸莫諾苷含量較高，甚至比馬錢素還高，而且莫諾苷也是山茱萸主要活性成分之一，所以筆者認為莫諾苷也應(yīng)該成為考察山茱萸質(zhì)量優(yōu)劣項目之一。