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加急見刊

地稔水煎液鎮痛抗炎藥效學的實驗研究

周芳

【摘要】 目的進一步明確地稔的藥理作用,為臨床用藥提供科學的理論依據。方法采用熱板法和扭體法觀察地稔的鎮痛作用,用二甲苯致小鼠耳廓腫脹及腹腔染料滲出法, 觀察地稔的抗炎作用; 用玻片法和毛細玻管法觀察地稔對小鼠凝血時間的影響。結果地稔水煎液能顯著提高小鼠痛閾值,降低毛細血管通透性,抑制由二甲苯所致的炎癥反應,可顯著減輕小鼠耳廓腫脹。但對小鼠凝血時間無影響。結論 地稔水煎液具有明顯的鎮痛和抗炎作用。

【關鍵詞】 地稔 鎮痛 抗炎 止血

Experimental Study on Pharmacodynamics in Analgesic and Anti-inflammation of Water-extract of Melastoma dode candrum Lour

ZHOU Fang ,ZHANG Xing sheng,ZHANG Qixiao,SHAO Juan,HE Jianfeng,HUANG Chunlong

Guangxi Traditional Chinese Medical University, Nanning,Guangxi 530001,China

Abstract:ObjectiveTo research the analgesic and anti-inflammative action of Melastoma dode candrum Lour, and to provide scientific experiment evidence for clinical applications.MethodsThe analgesic effect of Melestoma dode candrum Lour was obseved in the response of writhes and hot-plate tests.The anti-inflammatory effect of Melastoma dode candrum Lour was observed in inflammation models caused by dimethy benzene and in models with reinforce permeability of abdominal cavity caplillary caused by acetic acid in mice; the capillary method and glass plate method were used to determine the clotting-time of mice. Results Melastoma dode candrum Lour had a prominent analgesia effect, and restained the capillary permeability resulted from inflammation,auricle's swell by dimethybenzene.But showed no obvious effect in the clotting-time of mice.ConclusionMelastoma dode candrum Lour has remarkable effects of anti-inflammation and analgesia on experiment mice.

Key words:Melastoma dode candrum Lour; Analgesia; Anti-inflammatory ; Hemostasis

地稔(Melastoma dode candrum Lour),又名鋪地稔、地茄乾等,為野牡丹科植物。產于中國南方地區,越南也有,耐旱,喜半蔭且可在全日照下生長良好,全株可入藥,是一種有發展潛力的地被植物。《廣西本草選編》記載其味甘澀、性平具有消腫止痛、活血補血、止血、固澀燥濕等功效,用于治療血虛證、崩漏下血、痔瘡濕疹、尿路感染、風濕痹痛等疾病[1]。目前,鎮痛抗炎作用的藥物多為西藥,且副作用多,而中草藥地稔民間使用也有這方面的作用。本科研小組對地稔的鎮痛抗炎作用進行了實驗研究, 對其進一步開發和臨床應用提供一定的理論依據。

1 材料

1.1 動物

昆明種小鼠,普通級,動物合格證號:桂醫動字第11004,均由廣西中醫學院實驗動物中心提供,根據實驗性質和性別分籠喂養,自由采食飲水。

1.2 儀器

80Z型臺式離心機,上海手術器械廠生產;YLS 6A型智能熱板儀,山東省醫學科學院設備供應站生產; 722型光柵分光光度計,上海第三分析儀器廠生產;AEU-210型電子天平,日本島津廠生產。

1.3 藥品與試劑

干燥地稔,購于廣西南寧小瑤王藥店。硫酸羅通定注射液,廣東省博羅先鋒藥業集團有限公司生產,批號20040902;醋酸地塞米松,浙江仙琚制藥股份有限公司生產,批號20040405;伊文思藍,上海試劑采購供應站,批號91005015;冰醋酸,廣西南寧化學試劑廠生產,批號20040308;二甲苯,齊魯石化公司研究院試劑公司,批號20040607。止血敏,山西晉新雙鶴藥業有限公司,批號200505241。

1.4 制備地稔水煎液

取1 000 g,加8倍水浸泡1 h, 煎煮2次,煮沸30 min/次,合并藥液過濾濃縮至所需濃度,備用。

2 方法和結果

2.1 小鼠熱板法鎮痛實驗[2]

取雌性小鼠,放入(55±0.5)℃熱板測痛儀中,以舔后足作為疼痛反應指標,預測小鼠藥前痛閾值,選取在5~30s有痛閾反應的為合格小鼠,根據痛閾值的小鼠隨機分為5組,每組10只。分別為地稔大劑量40 g/kg,中劑量20 g/kg,小劑量10 g/kg;陽性對照羅通定30 mg/kg;灌胃給藥兩次,時間間隔為4 h。末次給藥后30,60,90,120 min分別測定痛閾值。各給藥組與對照組比較,統計數據以±s表示,統計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表1。表1 地稔對熱板法致痛小鼠的影響 (略)

2.2 小鼠扭體法鎮痛實驗[2]

取體重18~22g健康小鼠50只,雌雄各半,隨機分為5組,分組及給藥方法同“2.1”。末次給藥后60min腹腔注射0. 7%冰醋酸0. 2 ml/只,觀察15 min內出現的扭體次數。各給藥組與對照組比較,統計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表2。表2 地稔對冰醋酸致痛小鼠的影響 (略)

表1結果表明,地稔大劑量組在藥后30 min ,60 min能顯著提高小鼠痛閾值。

表2結果表明, 地稔中劑量組能減少小鼠的扭體次數,具有明顯的鎮痛作用, 但對冰醋酸致小鼠痛反應潛伏期無顯著性差異。

2.3 小鼠二甲苯致耳廓腫脹實驗[2]

取健康18~22 g雄性小鼠50只,陽性對照組地塞米松,劑量為4.5 mg/kg,其他分組與給藥均同“2.1”。灌胃給藥,1次/d,連續7 d,第8天藥后45 min,各鼠右耳廓前后均勻涂擦二甲苯0.0 5 ml /只,致炎15 min后將小鼠脫頸椎處死,剪下小鼠左右耳,用打孔器(直徑6 mm)分別在左、右耳同一部位打下同等大的圓形耳片,分別用Aeu-210型電子天平稱重,計算耳廓腫脹度 ,耳廓腫脹度= (右耳重量-左耳重量)。各給藥組與對照組比較,統計數據以(±s)表示,統計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表3。表3 地稔對小鼠耳廓腫脹的影響(略)

表3結果表明, 地稔各劑量組均能明顯抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹。

2.4 對小鼠毛細血管通透性影響的實驗[2]

取體重18~22 g健康小鼠50只,雌雄各半,分組及給藥方法同“2.3”。各鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍0. 1 ml /10 g(體重),并同時腹腔注射0.7%冰醋酸致炎0. 2 ml/只, 15 min后,脫頸椎法處死小鼠,然后腹腔注射6 ml生理鹽水沖洗腹腔,輕柔小鼠腹部,剪開腹腔收集洗出液,3 000 r/min離心5 min,取上清液于722分光光度計于590 nm處測定吸收度(OD值) 。各給藥組與對照組比較,統計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表4。表4 地稔對小鼠毛細血管通透性的影響(略)

表4結果表明,地稔大劑量能降低小鼠毛細血管通透性,減少腹腔液的滲出,具有明顯的抗炎作用。

2.5 地稔對小鼠凝血時間的影響(載玻片法;毛細玻管法)[3]取健康昆明種小鼠100只,體重(20±2)g,雌雄兼用,隨機分為10組,10只/組,生理鹽水組、陽性對照組(止血敏250 mg/kg),給藥方法同2.1。藥后60 min測定凝血時間。

2.5.1 載玻片法用內徑為0.9 mm毛細玻璃管從小鼠眼內眥部刺入,血液通過毛細玻璃管滴于載玻片上,立即用秒表記時,每隔30 s用清潔針頭自血滴邊緣向里輕輕挑動1次,觀察有無血絲形成,以后每隔15 s挑動1次,從采血開始至挑起血絲止,所歷時間即為凝血時間。

2.5.2 毛細玻管法用直徑為0.9 mm,長度0.8 cm毛細玻璃管刺入小鼠眼內眥球后靜脈叢,血液流進毛細玻璃管內,立即用秒表記時,30 s折斷玻璃管1次,觀察折斷玻璃管處有無血絲出現,以后每隔15 s折斷玻璃管1次,直至玻璃管內出現血絲即為凝血時間,所歷時間為凝血時間。實驗數據做統計學分析,進行兩組間t檢驗。結果見表5。表5 地稔對小鼠凝血時間的影響(略)

表5載玻片法、毛細玻璃管法結果顯示,各組與空白對照組比較無明顯差異,提示沒有明顯縮短凝血時間的作用。

上述實驗結果顯示,地稔水煎液具有一定的鎮痛抗炎作用,或有這種作用的趨勢,其鎮痛抗炎作用機制有待進一步研究。現用的是水煎液,其他提取物如醇提液是否有效或更有效也還值得進一步研究。地稔是瑤族人民民間長期使用的藥材,本實驗結果與民間臨床使用基本一致。為地稔進一步開發及臨床應用提供了一定的理論依據。

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