阿娜爾陰道泡騰片的藥效學研究
佚名
作者:徐磊,孫玉華,李濤,張云珍,李建娥, 顧政一
【摘要】 目的觀察阿娜爾陰道泡騰片的抗炎、止癢、抑菌作用。方法建立急性炎癥、慢性炎癥動物模型,家兔陰道炎模型觀察阿娜爾陰道泡騰片的抗炎、止癢、抑菌作用。結果阿娜爾陰道泡騰片(10%,20%)能夠抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹,抑制大鼠棉球肉芽腫的形成,抑制由角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹,提高豚鼠的致癢閾,和對照組比較有顯著性差異,阿娜爾陰道泡騰片能消除家兔陰道炎模型陰道充血、水腫、糜爛、分泌物增多的病變,抑制霉菌生長,明顯減輕陰道局部組織病理學改變。結論阿娜爾陰道泡騰片具有較好的抗炎、止癢、抑菌等作用。
【關鍵詞】 阿娜爾陰道泡騰片 抗炎 止癢 抑菌
阿娜爾陰道泡騰片由石榴皮、苦豆子等組成。為了探討其藥效作用,筆者進行了實驗動物的抗炎,止癢,抑菌作用的研究,以期為阿娜爾陰道泡騰片用于臨床治療陰癢、陰道炎、宮頸炎提供實驗依據。
1 材料
1.1 藥品與試劑
阿娜爾陰道泡騰片,0.75 g/片,含生藥1.49 g/片,批號041010,由新疆西部加斯特斯藥業公司提供。潔爾陰泡騰片,成都恩威制藥有限公司產品,批準文號:國藥準字210930008,批號040601。二甲苯,西安化學試劑廠,批號030701。角叉菜膠,美國Sigma公司產品。磷酸組織胺,衛生部藥品生物制品檢定所提供,批號030309。白色念珠標準菌株(ATCC10231),由新疆醫科大學提供。
1.2 動物
昆明種小鼠,Wistar大鼠,豚鼠,雌性新西蘭家兔,體重2.0~2.5 kg。均購自新疆醫科大學動物實驗中心。
2 方法與結果
2.1 小鼠耳廓二甲苯致炎實驗[1~3]取昆明種小鼠50只,雌雄各半,體重(20.0±1.4)g,按動物體重、性別隨機均分為NS對照組、陽性對照藥潔爾陰泡騰片組(10%溶液)、阿娜爾婦潔陰道泡騰片低、中、高3個劑量組(5%,10% ,20%溶液)每組10只。各給藥組大鼠涂藥1次/d(0.05 ml/20 g),涂于右耳,連涂5 d,空白對照組涂以等量的蒸餾水。末次涂藥30 min后, 各給藥組以蒸餾水洗去藥液,用棉球擦凈,給小鼠右耳涂以二甲苯0.03 ml/20 g,左耳為對照。30 min后,將小鼠斷頸處死,用直徑8 mm的打孔器,將雙耳相同部位各打下一片,用電子天平分別稱重,以左、右耳片重量之差作為腫脹度,計算各組腫脹程度,求出腫脹率。結果見表1。表1 阿娜爾陰道泡騰片對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(略)
2.2 對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響取大鼠50只,體重(149.5±19.9)g,雌雄兼用,按體重、性別隨機均分為生理鹽水組、陽性對照藥潔爾陰泡騰片組(10%溶液)和3個不同劑量的阿娜爾陰道泡騰片組(5%,10%,20%),每組10只。各給藥組大鼠右后足涂抹給藥,0.1 ml/100 g,1次/d,連續5 d。末次給藥30 min后,測量右后足跖厚度,然后每鼠右后足跖注射1%角叉菜膠溶液50 μl,注射后每隔1 h以千分卡尺測量1,2,3,5,7 h各組大鼠右后足跖厚度,依其差值表示腫脹度。結果見表2。表2 阿娜爾陰道泡騰片對大鼠角叉菜膠足跖腫脹的影響(略))
2.3 對大鼠棉球肉芽腫的影響取Wistar大鼠50只,體重(154.0±12.0)g,雌雄各半,按體重、性別隨機均分為生理鹽水組、陽性對照藥潔爾陰泡騰片、3個不同劑量的阿娜爾陰道泡騰片組,給藥劑量與實驗“2.2”相同。取棉球(20±1)mg/個,高壓消毒,每棉球注入氨芐青霉素0.1 ml,60℃烘干。在乙醚淺麻狀態下,各組大鼠左右前肢腋下皮膚無菌切小口1 cm,塞入一個棉球縫合。當天開始直腸給藥0.1 ml/100 g,1次/d,連續7 d。末次給藥后2 h打開原切口,將棉球及周圍結締組織一齊取出,剔除脂肪,80℃干燥,稱重,減去原棉球重即得肉芽腫重,計算藥物對肉芽腫的抑制率。結果見表3。表3 阿娜爾陰道泡騰片對棉球肉芽腫的影響(略)
2.4 止癢作用實驗[4]
取豚鼠60只,體重(351.1±13.5)g,雌雄各半,將豚鼠隨機分為6組,每組10只,給藥劑量與實驗“2.2”相同。實驗前一日,各組豚鼠右足后背剔毛,涂藥0.1 ml/100 g,實驗當日用粗紗布擦傷右后足背剃毛處面積1 cm2,再涂藥1次,對照組給予等量蒸餾水。涂藥后10 min,開始在創面滴0.01%磷酸組織胺0.05 ml/只,此后每隔3 min依0.01%,0.02%,0.03%,0.04%……遞增濃度,每次均為0.05 ml/只,直至出現豚鼠回頭舔右后足,以出現豚鼠回頭舔右后足時給予的磷酸組織胺總量為致癢閾,記錄并比較各組的致癢閾。結果見表4。表4 阿娜爾陰道泡騰片對磷酸組織胺致癢反應的影響(略)
2.5 抑菌實驗[5]
2.5.1 菌種
取白色念珠標準菌株(ATCC10231),接種改良沙氏瓊脂培養基孵育。臨用時,用0.9%生理鹽水將菌苔洗凈,調整濃度為3×108/ml備用。
2.5.2 造模
取雌性新西蘭家兔先用接種針,再用接種環分別在陰道口內2~4 cm處用“連續劃線法”接種白色念珠菌(濃度為3×108/ml),連續3 d。于接種后第6天,取陰道分泌物涂片,染色鏡檢,鏡檢下可見白色念珠菌感染者為陽性。
2.5.3 給藥
取造模成功動物40只,隨機分為5組:模型組,陽性對照藥組,阿娜爾陰道泡騰片小、中、大劑量組,另取8只為正常對照組。各組動物均陰道給藥,給藥時,家兔均倒置,擴張陰道,將藥物置入陰道內,保證藥物與粘膜充分接觸至少4 h。陽性對照藥組家兔陰道內置入潔爾陰泡騰片藥粉10 mg/kg;低劑量阿娜爾陰道泡騰片組家兔陰道置入藥粉10 mg/kg(相當于20 mg生藥/kg);中劑量阿娜爾陰道泡騰片組家兔陰道置入藥粉20 mg/kg(相當于40 mg生藥/kg);高劑量阿娜爾陰道泡騰片組家兔陰道置入藥粉40 mg/kg(相當于80 mg生藥/kg);模型組家兔和正常對照組給予溫生理鹽水沖洗,1次/d,連續14 d。
2.5.4 觀察指標對動物進行一般性觀察,觀察記錄陰道局部病變。藥后第3,7,15天取陰道分泌物鏡檢。末次給藥后24 h處死動物,取陰道組織做組織病理學檢查。
2.5.5 一般狀態觀察實驗家兔的毛色正常,四肢健壯,進食正常,體重有所增加,各組給藥動物在給藥期間無一只死亡。
2.5.6 陰道局部組織病變肉眼觀察實驗家兔接種白色念珠菌后,陰道充血、水腫,分泌增多,甚者陰道糜爛。給藥后各給藥組與模型組相比家兔陰道局部充血、水腫糜爛等病變逐漸好轉,分泌物逐漸減少。陰道涂片檢查:藥后第3天和第7天各給藥組均檢出白色念珠菌,藥后14 d各給藥組均未檢出白色念珠菌,模型組家兔各時段均檢出白色念珠菌。對陰道炎模型陰道病變的影響見表5~6。表5 阿娜爾陰道泡騰片對家兔陰道局部的影響(略)表6 阿娜爾陰道泡騰片家兔陰道涂片檢查(略)
3 小結
實驗結果表明,阿娜爾陰道泡騰片(10%,20%)能夠抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹,抑制大鼠棉球肉芽腫的形成,能夠抑制由角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹,能夠提高豚鼠的致癢閾,和對照組比較有顯著性差異,阿娜爾陰道泡騰片能消除家兔陰道炎模型陰道充血、水腫、糜爛、分泌物增多的病變,抑制霉菌生長,明顯減輕陰道局部組織病理學改變,提示阿娜爾陰道泡騰片具有較好的抗炎、止癢作用。通過以上急性炎癥、慢性炎癥、止癢實驗表明,阿娜爾陰道泡騰片具有較好的抗炎、止癢、抑菌作用。以上實驗為阿娜爾陰道泡騰片用于臨床治療陰癢、陰道炎、宮頸炎的有效性提供充分的實驗依據和保障。