不對稱還原3,5-雙三氟甲基苯乙酮的羰基還原酶的挖掘與功能驗(yàn)證
摘要：基因挖掘是獲得具有優(yōu)良性能生物催化劑的新方向.為了獲得能不對稱催化3,5-雙三氟甲基苯乙酮（ BTAP ） 制備（R）-3,5-雙三氟甲基苯乙醇（R-BTPE）的羰基還原酶, 以文獻(xiàn)報(bào)道的能不對稱催化BTAP生成R-BTPE的羰基還原酶LXCAR的氨基酸序列在GenBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行基因挖掘, 獲得同源性〉80%的序列24條.從中篩選并合成了同源性為88%、來源于未培養(yǎng)微生物的羰基還原酶BAP47456.1,在大腸桿菌異源表達(dá)并進(jìn)行功能驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)該羰基還原酶對BTAP表現(xiàn)出良好的立體選擇性, 還原產(chǎn)物為R-BTPE, 證明了基因挖掘的有效性.
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