【摘要】 目的探索簡便實用的采樣與檢測方法。方法用普通營養(yǎng)瓊脂和羊血營養(yǎng)瓊脂兩種平板對醫(yī)院環(huán)境空氣進行沉降采樣檢測，并進行比較。結果用普通營養(yǎng)瓊脂平板進行采樣和檢測，細菌總數(shù)超標率為15.3%，未檢出金黃色葡萄球菌;用羊血營養(yǎng)瓊脂平板進行采樣和檢測，細菌總數(shù)超標率為12.9%，檢出金黃色葡萄球菌4株。細菌總數(shù)超標率兩者間無統(tǒng)計學意義(χ2=6.81，P<0.05)。結論用羊血營養(yǎng)瓊脂平板對醫(yī)院環(huán)境空氣進行檢測，結果優(yōu)于用普通營養(yǎng)瓊脂平板進行監(jiān)測。

【關鍵詞】 普通營養(yǎng)瓊脂;羊血營養(yǎng)瓊脂;細菌總數(shù);金黃色葡萄球菌

為了探索簡便易行且實用的采樣與檢測方法，在監(jiān)測中，按消毒技術規(guī)范[1-2]，用普通營養(yǎng)瓊脂平板和羊血營養(yǎng)瓊脂平板同時布放采樣[3]，對細菌菌落總數(shù)和致病菌的檢測結果進行了比較觀察。

1資料與方法

1.1一般資料：

對市內(nèi)6家大小醫(yī)院的環(huán)境空氣分別用普通營養(yǎng)瓊脂和羊血營養(yǎng)瓊脂進行沉降法布點采樣，經(jīng)過37℃ 48h培養(yǎng)，其監(jiān)測結果指數(shù)為菌落總數(shù)和金黃色葡萄球菌。

1.2平板的制備：

將滅菌后的普通營養(yǎng)瓊脂加熱溶化冷至45℃左右傾注平皿，每板17ml左右，冷卻后即得普通營養(yǎng)瓊脂平板。將冷至45℃左右營養(yǎng)瓊脂，按每100ml加入10ml脫纖維羊血，混勻后傾注平皿，每皿17ml左右，冷卻后即得羊血營養(yǎng)瓊脂平板。將制備好的平板翻轉放入37℃培養(yǎng)箱過夜，棄去長菌的平板，未長菌的平板用滅菌紙包好，放4℃-8℃冰箱備用(放置時間不得超過1周)

1.3采樣方法[1]：

室內(nèi)面積<30m2，設內(nèi)、中、外對角線3點布放，室內(nèi)面積≥30 m2，設4角及中央5點布放，各點距地面1.5m，將普通營養(yǎng)瓊脂平板和養(yǎng)血營羊瓊脂平板同時放于上述各點，打開平板蓋，空氣中暴露5min后蓋好平板蓋，用滅菌紙包好立即送檢。

1.4檢驗：

將送檢樣品放入37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h后，計數(shù)各個平板的菌落總數(shù)，同時進行致病菌的檢測，按下式計算菌落總數(shù):細菌菌落總數(shù)(cfu/m3)=50000N/A×T。式中A為平板的面積(cm2)，T為暴露時間(min)，N為平均菌落數(shù)(cfu)。

1.5評價標準：

Ⅰ類區(qū)域：細菌總數(shù)≤10 cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌為消毒合格;Ⅱ類區(qū)域: 細菌總數(shù)≤200 cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌為消毒合格;Ⅲ類區(qū)域: 細菌總數(shù)≤500 cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌為消毒合格。

2結果

2.1監(jiān)測結果：

普通營養(yǎng)瓊脂平板檢測樣品340份中，細菌菌落總數(shù)超標52份，未檢出金黃色葡萄球菌。羊血營養(yǎng)瓊脂平板監(jiān)測樣品340份中，細菌菌落總數(shù)超標44份，超標率為12.9%，檢出金黃色葡萄球菌4份。兩組瓊脂平板比較，χ2=0.776，P>0.05，說明細菌總數(shù)超標率兩者之間差異無統(tǒng)計學意義，致病菌檢測結果兩者間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2平均菌落數(shù)區(qū)間分布的樣品比例數(shù)：

兩者在平均菌落數(shù)各區(qū)間分布的樣品比例數(shù)無統(tǒng)計學意義(χ2=6.81，P>0.05，表1)。表1兩種平板平均菌落數(shù)區(qū)間分布樣品比例的比較

3討論

檢測結果表明，用普通營養(yǎng)瓊脂平板和羊血營養(yǎng)瓊脂平板同時對醫(yī)院環(huán)境空氣各監(jiān)測340份，細菌總數(shù)前者超標為52份，后者超標為44份，兩者無統(tǒng)計學意義。從平均菌落數(shù)在≤1 cfu/平板至>5 cfu/平板各區(qū)間分布的樣品比例數(shù)來看，各區(qū)間分布的樣品比例數(shù)也無統(tǒng)計學意義。前者未檢出金黃色葡萄球菌，后者檢出4株金黃色葡萄球菌。由于金黃色葡萄球菌在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長無特征性，要鑒定就要逐個菌落進行，這樣工作量大，浪費時間，難免遺漏，而在羊血營養(yǎng)瓊脂平板上的生長都有特征性的溶血環(huán)產(chǎn)生，能準確判定可疑菌落并進行鑒定，省時省力，提高檢出率。在實際工作中用后者替代前者采樣，不但省時省力，提高工作效率，而且在布放平板時還可減少對被測環(huán)境空氣的攪動，使結果更準確。因此，采用羊血營養(yǎng)瓊脂平板對醫(yī)院環(huán)境空氣進行監(jiān)測，其細菌總數(shù)檢測結果與采用普通營養(yǎng)瓊脂平板檢測結果差異無統(tǒng)計學意義，而對致病菌的檢測其結果明顯優(yōu)于普通營養(yǎng)瓊脂平板。