薜荔藥材兩種提取物的抗炎作用研究
佚名
作者:毛彩霓,楊衛(wèi)麗,劉明生
【摘要】 目的:比較薜荔水提取物與乙醇提取物的抗炎作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法和醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)管通透性增高法觀察薜荔水提取物與乙醇提取物對(duì)炎癥的抗炎作用。結(jié)果:醇提取物對(duì)兩種抗炎模型均有明顯的抑制作用,能顯著降低小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加及抑制小鼠耳廓腫脹。結(jié)論:薜荔藥材乙醇提取物的抗炎效果優(yōu)于水提取物。
【關(guān)鍵詞】 薜荔;提取物;抗炎
[ABSTRACT] Objective: To observe the antiinflammatory effects in water extracts and alcohol extracts of Ficus pumila L. Methods: The antiinflammatory action was assessed by xyleneinduced ear swelling in mice and HAcinduced peritoneal capillary permeability in mice. Results: Alcohol extracts of Ficus pumila L. significantly improved the ear swelling in mice and inhibited the phlogistic infiltration in mice. Conclusion: Antiinflammatory effect of alcohol extracts of Ficus pumila L. is better than alcohol extracts of Ficus pumila L.
[KEY WORDS] Ficus pumila L.;Extracts;Antiinflammatory
薜荔(Ficus pumila L.)是屬桑科(Moraceae)榕屬(Ficus L.)攀援植物,又名木蓮、涼粉樹、爬墻虎、王不留行等[1],薜荔的莖、葉可供藥用, 性平,味淡酸微苦,可祛風(fēng)除濕,通血活絡(luò),解毒消腫,產(chǎn)于我國(guó)和日本,在我國(guó)主要分布于江西、湖南、四川、海南和臺(tái)灣等省區(qū),在海南主要產(chǎn)于昌江,白沙,文昌,萬寧與保亭等市縣[1]。藥理研究顯示薜荔具抗菌、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、抗誘導(dǎo)、抗炎鎮(zhèn)痛與驅(qū)蛔蟲等活性[2]。
本實(shí)驗(yàn)首次采用小鼠耳廓腫脹和醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性炎癥模型觀察薜荔藥材傳統(tǒng)水煎煮提取物與乙醇提取物的抗炎效果,為進(jìn)一步開發(fā)利用該植物資源提供依據(jù)。
1 材料與方法
毛彩霓等.薜荔藥材兩種提取物的抗炎作用研究
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試藥
R205旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申勝生物技術(shù)公司);SH2D(Ⅲ)型循環(huán)水式真空泵(鞏義市英峪予華儀器廠);日本JASCO650紫外分光光度計(jì)(日本分光);FA1104電子分析天平(梅特勒—托利多儀器有限公司,上海);TGL16c高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);DK9811A電熱恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)。
薜荔采自海南省萬寧市興隆華僑農(nóng)場(chǎng),經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所鑒定為桑科(Moraceae)榕屬(Ficus L.)植物薜荔(Ficus pumila L.)藥材;阿司匹林腸溶片(湖南新匯制藥有限公司提供,批號(hào):090201);伊文思藍(lán)(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號(hào):WC20090209);二甲苯、正丁醇、乙酸乙酯均為分析純;生理鹽水(海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)室配制)。
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明種小鼠,體重18~22g,雌雄各半,由湖南省長(zhǎng)沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技服務(wù)部提供(許可證號(hào):SCXK(湘)20060001)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)性質(zhì)和性別分籠喂養(yǎng),自由采食飲水。
1.3 薜荔藥材不同提取物的制備
1.3.1 薜荔水提取物
取干燥薜荔莖葉藥材300g,加10倍量水煎煮提取兩次,每次1.5h,濾過,兩次濾液合并,濃縮至每毫升對(duì)應(yīng)薜荔生藥5g。
1.3.2 薜荔醇提取物
取干薜荔莖葉藥材300g,加7倍量75%乙醇[3]回流提取3次,合并濾液,減壓回收乙醇至無醇味,濃縮至每毫升對(duì)應(yīng)薜荔生藥5g。
1.4 抗炎實(shí)驗(yàn)
1.4.1 二甲苯致小鼠耳廓腫脹法[4]
選取昆明小鼠40只,體重18~22g,雌雄各半,隨機(jī)分為4組,雌雄各半,每組10只。給藥組分別為水提取物組、乙醇提取物組(二者劑量均為按生藥量計(jì)100g/kg),陽性對(duì)照組為阿司匹林組(0.2g/kg),空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水。各組灌胃給藥,1次/d,給藥容積0.4mL/20g小鼠體重,連續(xù)7d,于末次給藥1h后,將二甲苯(20μL/只)均勻涂于每只小鼠右耳正反兩面,左耳不涂作對(duì)照,致炎30min后脫頸椎處死小鼠,沿耳廓基線剪下雙耳,用打孔器(直徑9mm)在相同位置取下圓耳片,電子天平稱重,計(jì)算左耳片和右耳片的重量差值(腫脹度)及腫脹率:
腫脹率(%)=(右耳重-左耳重)/左耳重×100%。
1.4.2 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高法[5]
取昆明種小鼠40只,體重18~20g,雌雄各半,隨機(jī)分為4組,每組10只,組別與給藥方法都同“1.4.1”項(xiàng)。末次給藥20min后給各小鼠尾靜脈注射 0.5%伊文思蘭溶液10mL/kg,隨即腹腔注射 0.6%醋酸溶液0.01mL/只。20min后脫頸椎處死,暴露腹腔,用5mL生理鹽水洗滌腹腔,吸取洗滌液約3mL,3000r/min離心15min,取上清液于590nm處用比色法測(cè)定吸光度(A)。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
各組數(shù)據(jù)以±s表示,組間差異比較用t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
2 結(jié)果
2.1 對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響
二甲苯致小鼠耳腫脹模型是急性非特異性炎癥模型,薜荔水提取物組、乙醇提取物組均能使小鼠耳廓腫脹明顯降低,與空白對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。說明薜荔水提取物、乙醇提取物對(duì)急性、早期炎癥具有很好的抗炎作用。結(jié)果見表1。表1 薜荔藥材提取物對(duì)耳廓腫脹的影響注:與空白對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
3.2 對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響
薜荔藥材乙醇提取物能降低醋酸引起的小鼠毛細(xì)血管通透性增加,使腹腔內(nèi)滲出的染料明顯減少(P<0.05),與水提取物比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明薜荔醇提取物可以降低毛細(xì)血管的通透性,減少急性、早期炎癥的滲出,而水提取物無效果。結(jié)果見表2。表2 薜荔藥材提取物對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(±s)
3 結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)首先通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察了二者是否具有抗炎作用及具有抗炎效果的最佳劑量。本預(yù)實(shí)驗(yàn)采用二甲苯所致小鼠耳廓腫脹模型進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),每組6只小鼠,將給藥組分為低、中、高劑量組,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,中劑量組抗炎效果明顯,故確定給藥量為中劑量,即:按生藥量計(jì)100g/kg。
薜荔醇提取物可顯著抑制兩種抗炎模型(P<0.01),而薜荔水提取物僅能抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹(P<0.05),說明薜荔藥材醇提取物能抑制毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性增加、滲出性水腫為主的炎癥早期反應(yīng),且抗炎效果優(yōu)于水提取物,此結(jié)果為進(jìn)一步尋找抗炎有效成分提供科學(xué)依據(jù)。