作者：王興寧 張明時 夏品華 楊瓊

【摘要】 目的建立辛夷藥材中桉油精含量的測定方法。方法采用水勻漿破碎，揮發油提取器中回流提取， ＦＦＡＰ 毛細管色譜柱（３０ ｍｍ ×０．３２ ｍｍ，０．３２ μｍ）分離，火焰離子化檢測器（ＦＩＤ）檢測，以苯乙烯為內標，毛細管氣相色譜法測定辛夷藥材中桉油精的含量。結果在桉油精進樣量為０．４ ～３．０ ｍｇ 時有良好的線性關系（r＝０．９９９ ８）；加標平均回收率為９９．３％，RSD為１．８％。結論加水勻漿破碎可有效地防止破碎過程中桉油精的揮發。不同產地辛夷藥材桉油精含量相差很大。

【關鍵詞】 辛夷 桉油精 毛細管氣相色譜

Abstract：ObjectiveＴｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ＧＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｉｎｅｏｌ ｉｎ Ｘｉｎｙｉ．MethodsXｉｎｙｉ ｗａｓ ｐｕｌｖｅｒｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｗａｔｅｒ， ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ａｎｄ sｅｐａｒａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ ＦＦＡＰ （３０ ｍｍ ×０．３２ ｍｍ，０．３２ μｍ） ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃｉｎｅｏｌ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆｌａｍｅ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｏｒ （ＦＩＤ）.Ｓｔｙｒｅｎｅ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ．ResultsＴｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ０．４～３．０ ｍｇ （r＝０．９９９ ８）， ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．３％， RSD ｗａｓ １．８％．ConclusionＴｈｅｒｅ ｅｘｉｓｔｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃｉｎｅｏｌ ｉｎ Ｘｉｎｙｉ， wａｔｅｒ ｓｔｉｒｒｉｎｇ ａｎｄ ｐｕｌｖｅｒｉｚｉｎｇ ｃａｎ ａｖｏｉｄ ｔｈｅ ｖｏｌａｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｃｉｎｅｏｌ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｉｒｒｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ａｖａｉｌａｂｌｙ ．

Key words：Ｘｉｎｙｉ； Ｃｉｎｅｏｌ； Ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 辛夷，又名紫玉蘭、望春花，屬木蘭科木蘭屬落葉喬木［１］ ，其花蕾入藥稱辛夷。有散風寒、通鼻竅之功效［２］ 。辛夷揮發油是一種重要的天然香料，廣泛用于醫藥、日化和香精香料等行業［３］ 。辛夷揮發油的測定及化學成分的質譜分析已有報道，提取方法有水蒸氣蒸餾法［４］ 、浸膏法［５］ 、超臨界ＣＯ２ 流萃取法［６］等，以上方法提取辛夷中揮發油時，樣品的破碎對桉油精的回收率有很大的影響［４］ 。桉油精是辛夷揮發油的重要組成部分，國內對辛夷藥材桉油精含量測定的相關報道很少，２００５ 版《中國藥典》Ⅰ部附錄ⅩＣ 給出的桉油精含量測定法使用ＰＥＧ２０Ｍ ＋ＯＶ－１７ 混裝氣相色譜填充柱，適用于成分不太復雜的藥材和中成藥中桉油精含量測定。辛夷藥材揮發油的成分復雜，《中國藥典》的方法不能使與桉油精相鄰的峰分離。因此，本實驗選用ＦＦＡＰ 毛細管柱建立了辛夷藥材中桉油精含量的氣相色譜內標測定方法，采用勻漿破碎回流提取有效地防止了辛夷藥材中桉油精的揮發，確保了測定結果的真實性和準確性。

1 儀器和材料 島津ＧＣ －１６Ａ 氣相色譜儀、ＦＩＤ 檢測器、ＳｅＰｕ３０００ 色譜工作站；勻漿機（Ｔｈｅ ｖｉｒｔｉｓ ｃｏｍｐａｎｙ ．Ｎｅｗ ｙｏｒｋ），ＦＦＡＰ 毛細管色譜柱。 辛夷藥材由貴陽中醫學院提供和鑒定，分別采自河南、廣西和貴州。 化學對照品桉油精（０７８８ －９２０２、供含量測定用、中國藥品生物制品檢定所）；苯乙烯（化學試劑、純度大于９９％、無干擾測定峰）。其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的配制準確稱取對照品桉油精適量，用甲醇溶解后置于１０ ｍｌ 容量瓶中，配制成２０ ｍｇ／ｍｌ 的儲備液，精密取出０．０５０ ｍｌ 儲備液于５．０ ｍｌ 的０．２５ ｍｇ／ｍｌ 的苯乙烯－三氯甲烷內表液中，加水１ ｍｌ，振搖提取０．５ ｍｉｎ，離心，下層有機相為對照品溶液。

2.2 樣品溶液的配制取辛夷藥材１０ ｇ，精密稱量于勻漿罐中，加水１５０ ｍｌ，勻漿，漿液及洗滌勻漿罐的水一并轉移到２５０ ｍｌ 蒸餾瓶中，加入環己烷５．０ ｍｌ，于揮發油提取器［７］中回流提取４ ｈ，有機相收集于離心試管中，離心、將上清有機相轉入１０ ｍｌ 容量瓶中，分別用２．５，２ ｍｌ 環己烷洗用過的提取器收集管和離心試管，離心、將上層有機相一并轉入１０ ｍｌ 容量瓶中用環己烷定容為待測溶液，精密吸取待測溶液０．２５ ｍｌ，內標溶液５．００ ｍｌ，于１０ｍｌ 具塞離心試管中，加水１．０ ｍｌ，振搖提取０．５ ｍｉｎ，離心，下層有機相為供試品溶液。

2.3 色譜條件用ＦＦＡＰ 毛細管色譜柱（３０ ｍｍ ×０．３２ ｍｍ，０．３２ μｍ）；氮氣（Ｎ２ ）為載氣、柱前壓８０ ｋＰａ；汽化室溫度２４０℃；檢測器溫度２４０℃；柱溫：８０℃保留６ ｍｉｎ，以４０℃／ｍｉｎ 的速率升到２２０℃，保留２ ｍｉｎ；以苯乙烯為內標在火焰離子化檢測器（ＦＩＤ）上測定桉油精含量。

2.4 色譜柱和內標物的選擇分別用ＳＥ －３０，ＳＥ －５４，ＯＶ －１７０１ 和大口徑、小口徑的ＦＦＡＰ 毛細管柱進行對照品和樣品的測定。結果表明，桉油精在大口徑、小口徑的ＦＦＡＰ 毛細管柱的峰形都很好，但樣品經大口徑的ＦＦＡＰ 毛細管柱分離，有一小峰不能與內標物分開。經各種內標物醋酸乙酯、冰片、萘和苯乙烯比較表明，苯乙烯能與其它峰完全分開且在恰當時間出峰。因此，選擇苯乙烯為內標，色譜柱為小口徑的ＦＦＡＰ 毛細管柱。樣品與對照品的分析圖譜見圖１。

圖１ 氣相色譜圖（略）

2.5 前處理方法的選擇經不同前處理方法比較桉油精的揮發損失試驗，結果表明：辛夷藥材在４０ ～４５℃烘干４ ｈ，其中的桉油精揮發損失約３０％；將辛夷藥材在套環式撞擊制樣機中粉碎，撞擊使樣品破碎而同時發熱，桉油精揮發損失３０％以上；破碎的樣品于燒杯中室溫下敞開放置５ ｄ 桉油精全部揮發。因此，本實驗采用加水勻漿破碎，回流提取分析辛夷藥材中的桉油精含量，有效地防止了辛夷藥材中桉油精的揮發，測定結果比干法粉碎的結果要高。

2.6 提取時間的選擇取辛夷藥材１０ ｇ，精密稱量于勻漿罐中，加水１５０ ｍｌ，勻漿，漿液及洗滌勻漿罐的水一并轉移到２５０ ｍｌ 蒸餾瓶中，加入環己烷５．０ ｍｌ，于揮發油提取器中回流提取，考察提取時間與提取率。結果見表１。

表1 辛夷藥材中桉油精的提取率（略）

從表１ 可知，采用勻漿破碎后，回流提取≤４ ｈ 時，隨蒸餾時間的增長，出油率增高，蒸餾時間＞４ ｈ 后，延長蒸餾時間，出油率變化不大，且可能影響按油精的質量。因此，辛夷藥材的最佳蒸餾時間為４ ｈ。

2.7 線性關系考察配制桉油精標準溶液系列，桉油精加入量分別為０．４，０．８，１．２，１．６，２．０，２．５，３．０ ｍｇ，加水１．０ ｍｌ，內標液５．００ ｍｌ，振搖提取０．５ ｍｉｎ，離心，吸取下層２．０ μｌ，注入氣相色譜儀測定，以相對峰面積A’／對加入桉油精ｍ （ｍｇ）進行線性回歸，在０．４ ～３．０ ｍｇ 范圍內，線性方程為A’＝０．６６２ ２ m ＋０．０１４ ９（r＝０．９９９ ７）。

2.8 精密度試驗與重現性實驗取對照品溶液２．０ μｌ，按色譜條件進行測定，連續進樣５ 次，求出桉油精的相對峰面積，RSD為０．２２％。 取同一個批號辛夷藥材制成的供試品溶液５ 份各２．０ μｌ，按色譜條件進行測定，連續進樣５ 次，求出桉油精的相對峰面積， RSD為１．１２％。

2.9 回收率實驗精密稱取辛夷藥材５ ｇ ，共計９ 份，分別加入桉油精２４．００，３０．００，３６．００ ｍｇ，制備成供試品溶液，分別進樣測定，記錄色譜圖。結果表２。

表2 回收率實驗結果（略）

2.10 樣品測定按本實驗建立的方法測定了河南、廣西和貴州不同產地的辛夷藥材，結果表明，不同產地的藥材中桉油精的含量差異很大。

3 結論 本實驗建立的加水均漿制樣有效地防止了辛夷藥材中桉油精的揮發，確保了測定結果的可靠性。 通過對十余批辛夷藥材中桉油精的測定，表明本法具有良好的精密度和準確性，可用于辛夷藥材的質量控制。