【關鍵詞】 鹽酸曲馬多

Pharmacokinetics and relative bioequivalence of tramadol hydrochloride in healthy volunteers

【Abstract】 AIM: To compare the pharmacokinetic parameters and relative bioavailability of domestic and imported tramadol hydrochloride tablets so as to ensure quality of the medicine. METHODS: An open， randomized， two period crossover study with a two week washout interval was performed in 18 healthy volunteers. Concentrations of tramadol in serum were assayed by HPLC FR method. The pharmacokinetics parameters， AUC， Cmax and Tmax， were analyzed by two one side t test. RESULTS: The concentration time course after medication conformed to a 1 compartment open model with a first order absorption. The AUC（0 24 h）， Cmax and Tmax of tramadol were （2173±680） and （2252±597） μg?h/L，(223±79) and （229±65）μg/L， （2.28±0.67） and （2.33±0.67）h respectively. The relative bioavailability of tramadol was 96.40%. CONCLUSION: Two tablets are bioequivalent.

【Keywords】 tramadol hydrochloride; pharmacokinetics; biological availability; chromatography， high pressure liguid

【摘要】 目的： 比較國產和進口鹽酸曲馬多片在人體內的藥物代謝動力學和生物等效度，確保臨床用藥質量. 方法： 18例男性健康受試者采用標準二階段自身交叉對照試驗法服用藥物，以高效液相色譜熒光法測定受試者服藥后24 h內血清中曲馬多經時濃度，計算曲馬多的藥動學參數，并將數據作統計學處理. 結果： 國產和進口鹽酸曲馬多的血藥達峰時間Tmax（實測值）分別為（2.3±0.7）和（2.3±0.7） h，峰值血清濃度Cmax（實測值）分別為（223±79）和（229±65）μg?L-1，藥時曲線下面積AUC（0 24h）分別為（2173±680）和（2252±597）μg?h?L-1，兩種鹽酸曲馬多片上述藥動學參數間均無統計學差異（P>0.05），國產對進口鹽酸曲馬多片的相對生物利用度為96.40%. 結論： 兩種制劑在人體內具有生物等效性.

【關鍵詞】 鹽酸曲馬多；藥代動力學；生物利用度；色譜法，高壓液相

0引言

鹽酸曲馬多是一種中樞性非麻醉鎮痛藥，其主要作用于中樞神經系統與疼痛相關的特異性受體，無致平滑肌痙攣和呼吸抑制作用，鎮痛作用可維持4~6 h，具有較強的鎮痛作用，適用于各種原因引起的急、慢性疼痛. 本品耐受性和依賴性很低，易被患者所接受. 為評價國產鹽酸曲馬多片在人體內的生物效應，我們采用二階段自身交叉對照的試驗方法，對進口和國產鹽酸曲馬多片在健康志愿者體內的藥物代謝動力學和生物等效度進行了比較，旨在為臨床合理用藥［1-5］提供理論依據.

1對象和方法

1.1對象①對象： 18名男性健康志愿者，平均年齡（24.22±3.23）歲，經體檢（血尿常規、肝腎功能及心電圖檢查等指標）均正常，受試者實驗前2 wk及實驗期間未用過其他任何藥物，無藥物過敏史，實驗期間禁煙、酒及含藥物、乙醇的飲料等，并簽署知情同意書. ② 儀器：LC 10AVP高效液相色譜系統（Shimadzu， Japan），含兩臺LC 10ATvp型泵，7725型進樣閥（配100 μL定量環），RF 10AXL熒光檢測器，CTO 10Asvp柱箱，Class vp 5.032色譜工作站(Shimadzu，Japan)，Hypersil C18不銹鋼分析色譜柱（150 mm×4.6 mm， 5 μm）. ③ 試驗藥品：受試品鹽酸曲馬多片由石家莊制藥集團有限公司生產（50 mg/片），參比品：進口鹽酸曲馬多片（50 mg/片），鹽酸曲馬多對照品由石家莊制藥集團有限公司提供（含量99.6%）. 乙腈為色譜級，磷酸等均為分析純.

1.2色譜條件Hypersil C18不銹鋼分析色譜柱（150 mm×4.6 mm， 5 μm）；流動相為乙腈：（0.05 mol?L-1， pH=3.8）磷酸緩沖液=30∶70，流速1.2 mL?min-1，熒光檢測波長Ex=275 nm，Em=304 nm.

1.3方法

1.3.1血清樣品測定精取樣品血清1.0 mL于尖底10 mL的離心試管中，精密加入0.5 mL的NaOH溶液（0.5 mol?L-1），漩渦混合1 min，加入5.0 mL的乙酸乙酯萃取液，漩渦振蕩提取3 min，離心10 min（4000 r?min-1），精取上層有機相4.0 mL于另一離心管中，置40℃水浴上，以氮氣吹干，加流動相150 μL定溶，取100 μL進樣，外標法定量，Class vp5.032色譜工作站自動計算并打印曲馬多的色譜峰面積，將峰面積代入標準曲線方程，求出曲馬多的血清濃度.

1.3.2標準曲線制備取空白混合人血清1.0 mL共7份，分置于試管中，加入適量曲馬多標準液，使血清中曲馬多濃度依次分別為400.00， 200.00， 100.00， 50.00， 25.00， 12.50和6.25 μg?L-1，按上述血清樣品測定方法操作，以曲馬多的血清濃度C （μg?L-1）對曲馬多的色譜峰面積（A）作線性回歸，求得標準曲線方程為：C=1.8370×10-4 A- 0.8364 (r =0.999， n=6).

1.3.3回收率取空白血清3份，加入適量的曲馬多標準液，分別配成低、中、高3個濃度的曲馬多樣品12.50， 50.00和200.00 μg?L-1，按樣品測定法各測定含量6次，計算方法回收率，結果分別為（94.32±1.86）%， （94.29±1.26）% 和（93.74±0.59）%.

1.3.4精密度取空白血清加入適量曲馬多標準液，配制成低、中、高濃度分別為12.50， 50.00和200.00 μg?L-1血清樣品，在1 d內按樣品測定法重復測定6次，求得曲馬多日內RSD分別為3.75%， 2.29和1.21%. 將上述3濃度的樣品在8 d內陸續各重復測定6次，求得對應的日間RSD分別為5.18%， 2.87%和1.53%.

1.3.5樣品穩定性試驗將高、中、低3個濃度（12.50， 50.00和200.00 μg?L-1）的曲馬多血清樣品分別置于-20℃冰凍2 wk后于37℃條件下解凍，按前述方法測定曲馬多血清濃度變化（n=6），計算冰凍2 wk及凍融對樣品穩定性影響，求得冰凍前后濃度變化比率分別為（99.97±1.61）%， （100.20±1.33）%， （100.42±1.27）%.

1.4試驗設計以標準二階段交叉自身對照試驗法，將18名志愿者隨機分為兩組. 試驗第1階段第1組受試者口服進口鹽酸曲馬多片100 mg，第2組口服國產鹽酸曲馬多片100 mg. 經1 wk清洗期后，兩組交換服藥品種進行第2階段試驗. 每次試驗前晚禁食12 h，試驗當日晨空腹用200 mL溫開水吞服藥物. 在服藥后的第4小時進食統一低蛋白、低脂肪標準午餐. 受試者口服藥物前抽取空白血樣5 mL，在服藥后0.5， 1， 2， 3， 4， 6， 8， 12， 16， 20和24 h分別采靜脈血5 mL，置無菌干燥試管中，離心分離出血清置于無菌干燥塑料管中，于-20℃保存待測.

統計學處理：18例健康志愿者的血藥濃度 時間原始數據用中國藥理學會編制的實用藥代動力學計算程序3P87處理，求算藥代動力學參數. 以梯形法求算AUC ，Tmax和Cmax 均采用實測值，用孫瑞元等編制的NDST21W統計學軟件，將兩種制劑中曲馬多的AUC（0 24 h）， AUC（0 inf）， Cmax和Tmax進行配對雙單側t檢驗（AUC和Cmax先經對數轉換），進行生物等效性評價.

2結果

2.1色譜行為在本色譜條件下，曲馬多保留時間為5.03 min，曲馬多與血清組分離效果良好，無雜質干擾，可確保分析方法的專一性(Fig 1). 血清中曲馬多的最低檢出濃度（按信噪比≥3計）為3 μg?L-1.

圖1曲馬多色譜圖 （A）曲馬多標準（B）空白人血清（C）樣品血清(略)

2.2血藥濃度測定用HPLC法測定18名志愿者口服兩種鹽酸曲馬多片后不同時間血清中的曲馬多濃度，口服受試品國產曲馬多片組與口服參比品進口鹽酸曲馬多片中曲馬多的達峰時間基本一致（以實測值相比），曲馬多濃度 時間變化趨勢基本一致，但兩種制劑的血藥濃度值及個體間血藥濃度值存在一定的差異(Fig 2).

2.3藥代動力學參數18例受試者血藥濃度 時間原始數據用3P87程序處理，得主要藥代動力學參數見Tab 1. 結果表明，兩種曲馬多片在人體內的代謝過程均呈一室開放模型.

2.4兩制劑的相對生物等效度分析以梯形法求算兩種曲馬多片的AUC（0 24 h）和AUC（0 inf），Cmax 和Tmax采用實測值，將兩種曲馬多片的AUC（0 24 h）， AUC（0 inf）， Cmax和 Tmax進行配對雙單側t檢驗（AUC和Cmax先經對數轉換），國產的曲馬多片相對于進口的曲馬多片生物利用度為96.40%，兩種曲馬多片制劑在人體具有生物等效性. 圖2口服100 mg鹽酸曲馬多片后血清中曲馬多的藥時曲線(略)

表1口服100 mg鹽酸曲馬多片后藥代動力學參數(略)

3討論

以HPLC測定血清中曲馬多的方法國內外均有報道［6-9］，一般多采用液液萃取、C18柱分離、熒光檢測的方法. 鑒于曲馬多的溶解特性，堿化血清樣品是影響藥物回收率的重要因素，在堿性條件下用有機溶劑（乙酸乙酯、乙醚等）萃取，可達到有效的提取. 經比較

從曲馬多血藥濃度的測定結果可見，18例受試者服用受試品和參比品后，兩組之間各參數間均無顯著性差異（P>0.05），說明兩種鹽酸曲馬多片在18例健康受試者體內的處置情況較為相似. 18例受試者的Cmax和AUC(0 24 h)個體間的差異較大，但同一受試者服用受試制劑和參比制劑后的Cmax和AUC(0 24 h)相近，提示鹽酸曲馬多片的個體差異較大，臨床使用時應結合治療藥物監測結果，進行個體化用藥.

從兩種鹽酸曲馬多片的生物等效性分析結果可見，兩種鹽酸曲馬多片的Cmax（實測值）、Tmax（實測值）和以梯形法求得的AUC（0 24 h）間的配對雙單側t檢驗結果均表明，兩種鹽酸曲馬多片在人體內具有生物等效性，受試品（國產鹽酸曲馬多片）相對于參比品（進口鹽酸曲馬多片）的相對生物利用度為96.40%，兩種制劑在人體內具有生物等效性.

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