【關鍵詞】 甲磺酸加替沙星

Assessment on pharmacokinetics and bioavailability of gatifloxacin mesylate capsules in healthy volunteers

【Abstract】 AIM: To study the pharmacokinetic parameters and bioavailability of gatifloxacin mesylate capsules. METHODS: An open， randomized， twoperiod crossover study was conducted in 18 healthy volunteers. Concentrations of gatifloxacin in plasma were assayed by HPLC after a single oral dose of 400 mg of the tested capsules or the referenced tablets. The main pharmacokinetic parameters ［AUC（0-24h）， Cmax and Tmax］ were analyzed by two onesided t test. RESULTS: The concentrationtime curve after medication conformed to onecompartment open model with a first order absorption. Tmax， Cmax and AUC(0-24h) of the tested capsules and the referenced tablet were（1.51±0.39） and （1.54±0.40） h， （3.48±0.84） and （3.43±0.96） mg?L-1，（34.51±8.49） and （33.04±10.25）mg?h?L-1 respectively. The relative bioavailability of the tested capsules tothe referenced tablets was 107.4%. CONCLUSION: The gatifloxacin mesylate has characteristic of quick absorption， high peak concentration in plasma and longer mean retention time; The result of statistical analysis showed that two formulations were bioequivalent (P>0.05).

【Keywords】 Gatifloxacin mesylate (GTFX?MSL); pharmacokinetics; biological aviatitity， chromatography， high pressure liquiol

【摘要】 目的： 研究甲磺酸加替沙星膠囊在健康人體內的藥代動力學及相對生物等效性. 方法： 采用雙周期隨機交叉、自身對照試驗設計法，將18例男性健康志愿者隨機分為兩組，分別單劑量口服甲磺酸加替沙星膠囊400 mg（試驗品）和甲磺酸加替沙星片400 mg（參照品），經1 w清洗期后交叉換藥，以高效液相色譜法測定受試者服藥后血漿中加替沙星的經時濃度，計算加替沙星藥動學參數，以雙單側t檢驗統計法比較兩種甲磺酸加替沙星制劑是否具有生物等效性. 結果： 甲磺酸加替沙星在人體內的處置為一級吸收單室模型，試驗品和參照品的主要藥動學參數Tmax（實測值）、Cmax（實測值）、AUC（0-24h）分別為：為(1.51±0.39)和(1.54±0.40) h，(3.48±0.84)和(3.43±0.96) mg?L-1，(34.51±8.49)和(33.04±10.25) mg?h?L-1；試驗品的相對生物利用度為107.4%. 結論： 甲磺酸加替沙星具有口服后吸收快、血藥濃度較高、體內平均滯留時間（MRT）較長的特點；兩種甲磺酸加替沙星制劑在人體內具有生物等效性(P>0.05).

【關鍵詞】 甲磺酸加替沙星；藥代動力學；生物利用度；色譜法，高壓液相

0引言

甲磺酸加替沙星（Gatifloxacin mesylate GTFX?MSL）是近3年由我國研制的第四代喹諾酮類藥物，屬國家一類新藥. 與前三代喹諾酮類藥物相比，甲磺酸加替沙星不但擴大了抗菌譜［1，2］，降低了喹諾酮類藥物特有的光穩定性差的缺點［1］，而且其抗菌活性更強［3，4］. 甲磺酸加替沙星與日本杏林制藥株式會社研發的鹽酸加替沙星相比，改善了水溶性差的不足，更易于機體吸收. 目前，關于甲磺酸加替沙星在人體內的藥動學及生物等效性研究國內外報道較少，我們采用HPLC法研究甲磺酸加替沙星膠囊在健康人體內的藥代動力學特征及相對生物等效性，以期為該藥今后在臨床安全有效、合理經濟的使用提供依據［5-7］. 1材料和方法

1.1材料① 儀器：LC10AVP高效液相色譜系統（Shimadzu， Japan），含兩臺LC10ATvp型7725型進樣閥（配100 μL定量環），CTO10Asvp柱箱，Classvp 5.032色譜工作站(Shimadzu，Japan)，Shimpack CLCODS C18分析色譜柱（150 mm×6 mm， 5 μm），甲醇為色譜級，其它試劑均為分析純. ②藥品： 受試品甲磺酸加替沙星膠囊(河南康泰制藥集團公司，批號20010922， 100 mg/粒); 參照品甲磺酸加替沙星片 (河南康泰制藥集團公司， 批號20010920，100 mg/片). 甲磺酸加替沙星對照品(中國藥品生物制品檢定所，含量77.8％). ③色譜條件： Shimpack CLCODS C18分析色譜柱（150 mm×6 mm， 5 μm）；流動相為∶甲醇∶水∶十二烷基硫酸鈉=500 mL∶500 mL∶3.5 g(磷酸調pH=3.0)，流速1 mL?min-1，檢測波長為292 nm.

1.2方法

1.2.1柱效及對稱因子測試在上述條件下，以加替沙星標準液測試，理論塔板數為7408，柱效良好，對稱因子為1.03，可滿足試驗測試的要求（0.95-1.05）.

1.2.2血漿樣品測定精取待測樣品血漿 0.5 mL于尖底2 mL的離心試管中，精密加入200 mL?L-1的高氯酸200 μL，漩渦振蕩1 min，離心8 min（10500 g），取上清液100 μL進樣，外標法定量，Classvp5.032色譜工作站自動計算并打印加替沙星的色譜峰面積，將峰面積代入標準曲線方程，求出加替沙星的血漿濃度.

1.2.3標準曲線的制備取空白混合人血漿2.0 mL共7份，分置于試管中，加入適量加替沙星標準液，使血漿中加替沙星濃度依次分別為0.15， 0.31， 0.62， 1.24， 2.48， 4.96和9.92 mg?L-1，按下述血漿樣品測定方法操作，以加替沙星的血漿濃度C（mg?L-1）對加替沙星的色譜峰面積（A）作線性回歸，求得加替沙星的標準曲線方程為：C=2.973×10-6A-0.0722 (r =0.999， n=6).

1.2.4方法回收率取空白血漿3份，加入適量的加替沙星標準液，分別配成高、中、低3個濃度的加替沙星樣品4.96， 1.24和0.31 mg?L-1，按樣品測定法各測定含量6次，計算方法回收率x±s，依次分別為(97.21±1.25)%， (96.54±1.94)% 和(96.40±2.41)%.

1.2.5方法精密度取空白血漿加入適量加替沙星標準液，配制成高、中、低濃度分別為4.96， 1.24和0.31 mg?L-1血漿樣品，在一日內按樣品測定法重復測定6次，求得加替沙星日內RSD分別為1.02%， 1.75%， 5.56%. 將上述3個濃度的樣品在8 d內陸續各重復測定6次，求得對應的日間RSD分別為1.64%， 3.47%和7.34%.

1.2.6志愿者及實驗設計18例男性健康志愿者，年齡18~40歲，質量（60.8±7.6） kg，身高(169.6±3.5) cm;血 、尿常規、肝功、腎功及心電圖檢查均正常，無藥物過敏史，試驗方案經西京醫院倫理委員會批準通過. 西京醫院臨床藥理基地與18人均簽署知情同意書. 將18人隨機分為兩組，試驗前2 wk及實驗期間禁服用其他任何藥物，實驗期間禁煙、酒及含咖啡因的飲料. 兩組受試者在禁食10 h后于次日晨分別空腹用240 mL溫開水口服試驗品（400 mg）和參照品（400 mg）. 服藥前抽取空白血樣5 mL，服藥后0.25， 0.5， 0.75， 1， 1.5， 2， 3， 6， 8， 12和24 h分別采靜脈血5 mL，置無菌抗凝試管中，離心分離出血漿置于無菌干燥塑料管中，于-20℃閉光保存，經1 wk清洗期后兩組受試者交叉換藥，實驗方法同前，在14 d內完成加替沙星的血藥濃度測定.

1.2.7數據處理Tmax和Cmax均采用實測值，以梯形法求算AUC，以消除相血藥濃度對數與時間的回歸方程計算體內消除半衰期. 甲磺酸加替沙星的主要藥代動力學參數詳見Tab 1. 將AUC和Cmax參數進行對數轉換后，以雙單側t檢驗法評價兩種甲磺酸加替沙星制劑在人體內的相對生物等效性.

2結果

2.1色譜分離在本色譜條件下， 加替沙星保留時間為4.8 min，分離度良好，可確保分析方法的專一性(Fig 1). 血漿中加替沙星的最低檢出濃度（按信噪比≥3計）為20 μg?L-1.

圖1色譜分析方法專一性測試結果(略)

2.2藥時曲線兩種制劑交叉給予18 名受試者后，其藥時曲線經擬合符合口服一室開放模型(Fig 2).

2.3藥動學及生物等效性分析以梯形法求算兩種甲磺酸加替沙星制劑的AUC(0-∞)， AUC（0-24h）， Tmax和Cmax采用實測值，以消除相血藥濃度的對數與對應點時間的線性回歸求算甲磺酸加替沙星膠囊的體內消除半衰期. 結果表明兩種制劑在健康志愿者體內的處置均符合一級吸收一室開放模型，其主要藥動學參數見表Tab 1. 以甲磺酸加替沙星膠囊為試驗制劑，以甲磺酸加替沙星片為參比制劑，求得試驗制劑的相對生物利用度為107.4%，將兩種制劑的主要藥動學參數Cmax， Tmax， 和AUC經雙單側t檢驗，結果表明，兩種制劑具有相同的生物效應.

圖2口服400 mg甲磺酸加替沙星后血漿中加替沙星的藥時曲線(略)

表1口服400 mg甲磺酸加替沙星后的藥動學參數(略)

3討論

目前測定鹽酸加替沙星血藥濃度的方法主要有HPLC法［8］及微生物法［9］，本實驗我們采用HPLC法測定血漿中甲磺酸加替沙星的濃度. 在流動相的選擇上，經比較優化色譜條件［9，10］，我們確定流動相為甲醇∶水∶十二烷基硫酸鈉=500mL∶500mL∶3.5 g(磷酸調pH=3.0)，結果顯示藥物與雜質分離良好. 在樣品的預處理上采用一步蛋白沉淀法， 即利用甲磺酸加替沙星在酸性條件下易溶于水的特點，加入適量200 mL?L-1的高氯酸，在去除內源性蛋白雜質的同時將加替沙星溶于水相，再以高速離心后取上清直接進樣分析，結果表明，本方法具有簡便快速和誤差較小的實用特點.

從Tab 1可知甲磺酸加替沙星片劑和膠囊劑在18 例健康受試者體內的處置情況較為相似，該結果與Annette等［9］和Christoph［10］等報道的鹽酸加替沙星片基本一致［10-14］.從血藥濃度測定結果可見，18 例受試者的Cmax 和AUC(0-24h)個體間的差異較大， 但同一受試者服用受試品和參照品后的Cmax和AUC(0-24h)相近，提示甲磺酸加替沙星有一定的個體差異，臨床使用時應加以注意.

總之，經配對雙單側t檢驗結果表明，兩種甲磺酸加替沙星制劑在健康人體內具有生物等效性，試驗品對于參照品的相對生物利用度略高，為107.4%.

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