作者：胥秀英，鄭一敏，傅善權，冉長青

【摘要】 目的小鼠血漿中葛根素的含量及藥代動力學研究。方法采用高效液相色譜法，流動相為甲醇-水（23∶77），流速1.0 ml·min-1，檢測波長250 nm，柱溫為25℃。結果葛根提取物口服后15min血液中即可檢出葛根素，在體內呈二室模型分布，其主要藥動學參數為A=1121.105 mg·L-1；B=237.5469 mg.L-1；α=0.6825 h-1；β=0.0459 h-1；Kα=1.3693 h-1；t1/2α= 1.015 6 h；t1/2β=15.0984 h；K10 =0.13 h-1 ；K21= 0.230 5 h-1 ；K12=0.362 h-1； Cmax=456.637 6 mg·L-1；Tmax=1.242 7 h；AUC=5 824.714 4 mg·h·ml-1。結論葛根提取物口服后葛根素在小鼠體內吸收快、消除慢。

【關鍵詞】 高效液相色譜 葛根素 藥代動力學

Abstract:ObjectiveTo determine the peurarin and pharmacokinetic in mouse plasma. MethodsHPLC method was used in the study .The analysis was carried out on Phenomenex Luna C18 column. The mobile phase was MeOH-H2O (23∶77).Flow rate 1.0 ml·min-1， wavelength 254 nm， temperature 25℃.ResultsThe results indicated that peurarin was detected after p.o. 15 min and the plasma C-T curve conform to two-compartment open model.The Pharmacokinetic parameter was below ：A=1 121.105 mg·L-1；B=237.5469 mg·L-1；α=0.6825 h-1；β=0.045 9 h-1；Kα=1.3693 h-1；t1/2α= 1.015 6 h；t12β=15.098 4 h；K10 =0.13 h-1 ；K21= 0.230 5 h-1；K12=0.362 h-1； Cmax=456.637 6 mg·L-1 ；Tmax=1.242 7 h；AUC=5 824.714 4 mg·h·ml-1。ConclusionThe peurarin is absorbed very fast and eliminates slow in mice.

Key words:HPLC； Peurarin ； Pharmacokinetic

葛根Radix Puerariae為常用中藥，性平，味甘辛，有解表退熱，生津止渴等功能，其主要有效成分葛根黃酮有改善腦循環及改善外周循環的作用，葛根素能明顯緩解心絞痛，降低心肌耗氧量，改變心肌缺血等［1］，臨床作為心血管系統疾病，糖尿病，高血脂病的輔助治療藥物［2］。本文對葛根提取物中葛根素在動物體內的含量及藥代動力學的研究報道如下。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑

葛根素對照品購自中國藥品生物制品檢定所；葛根提取物為本實驗室自制；乙腈為進口色譜純（美國TEDIA公司）；其他試劑為國產分析純；水為純水。

1.2 動物及給藥方式

昆明種小鼠體重為18～22 g，雌雄各半，為重慶市中藥研究院實驗動物研究室提供，葛根提取物劑量為10 g·kg-1，給藥方式為口服。

1.3 儀器

島津HPLC色譜儀（LC-10ATVP泵，SCL-10AVP控制器，SPD-10AVP紫外檢測器，CTO-10AVP柱溫箱，CLASS-VP6.10工作站）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件［3］

采用色譜柱Phenomenex Luna C18（4.6 mm ×150 mm，5 μm），流動相經篩選以甲醇-水（23∶77）為最好，流速1.0 ml·min-1，檢測波長250 nm，柱溫室溫。高效液相色譜數據由CLASS-VP6.10工作站處理，血藥濃度-時間數據由3P87軟件處理，得出主要的藥代動力學參數。

2.2 生物樣品制備

取小鼠7只，分別口服等量的葛根提取物，于給藥后15 ，30 min，1，1.5，2，2.5，3，4，5，7 ，10 h眼眶取血，肝素抗凝，3 000 r·min-1離心15 min，分離血漿，取0.2 ml上清液加入2 ml甲醇充分混合，3 000 r·min-1離心5 min，上清液于干燥箱烘干，殘渣加入0.2 ml甲醇超聲溶解，0.45 μm濾膜濾過備用。

2.3 方法專屬性考察

按2.2方法處理含藥血漿和空白血漿樣品，各進樣20μl，得HPLC色譜圖（圖1），葛根素分離度達1.5，無雜質峰干擾。

2.4 穩定性考察

取處理好的血漿樣品，分別于0，2，4，8，12 h在上述色譜條件下進樣20 μl，計算葛根素的峰面積，RSD為2.07%，即樣品在12 h內穩定。

2.5 線性關系考察

于空白血漿中加入葛根素對照品，使血藥濃度為0.055 g·L-1，在上述色譜條件下，分別進樣不同體積記錄峰面積，以葛根素峰面積為Y軸，葛根素的進樣量為X軸，由CLASS-VP6.10工作站，計算得葛根素回歸方程，其線性關系良好，分別為：Y=4.1893×106X-727.779，r=0.999 6，線性范圍為0.055 ～ 0.660 μg。

2.6 回收率和精密度實驗

于空白血漿中加入高、中、低3個濃度的葛根素對照品液，按樣品處理方法處理并測定，3個濃度血漿中葛根素的平均回收率103.41%，日內精密度為2.49%，日間精密度為3.16%。

2.7 葛根素的吸收

小鼠口服葛根提取物后，體內血藥濃度在2 h達高峰（見表1），2 h后開始下降，口服葛根提取物體內為二室模型分布，其體內藥時曲線見圖2，各項動力學參數見表2。 表1 口服葛根提取物后不同時間體內葛根素的含量（略）表2 小鼠血漿中的主要藥物動力學參數（略）

3 討論

葛根提取物口服后藥代動力學試驗表明，該藥口服吸收好，口服后30 min體內即可檢出，2 h達高峰，2 h后開始下降進入消除相。其主要藥動學參數為A=1 121.105 mg·L-1；B=237.546 9 mg·L-1；α=0.6825 h-1；β=0.045 9 h-1；Kα=1.369 3 h-1；t1/2α= 1.015 6 h；t1/2β=15.098 4 h；K10 =0.13 h-1 ；K21= 0.230 5 h-1；K12=0.362 h-1；Cmax=456.637 6 mg·L-1；Tmax=1.242 7 h；AUC=5 824.714 4 mg·h·ml-1。

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